[发明专利]一种利用染色体鉴定蝴蝶兰与火焰兰远缘杂交后代真杂种的方法

说明书

本发明涉及染色体鉴定技术领域，特别是涉及一种利用染色体鉴定蝴蝶兰与火焰兰远缘杂交后代真杂种的方法。所述方法包括：取亲本及子代的根尖，分别制成染色体标本，观察染色体数，确定亲本及子代的染色体倍性；当子代与亲本的染色体倍性不同时，则子代为真杂种；当子代倍性与亲本中的一种或两种相同时，则通过核型分析进行确定，若子代的染色体核型与亲本的核型不同，则子代为真杂种。本发明利用染色体鉴定方法对杂交后代早期小苗进行杂种真实性鉴定，从而判断杂交组合的真实性，而不用等到植株开花后，因此可以节省大量人力物力；此外，分析蝴蝶兰与火焰兰远缘杂交后代的染色体数目和核型还可以选择到染色体变异后代，从而选择出优异种质或品种。

技术领域

本发明涉及染色体鉴定技术领域，特别是涉及一种利用染色体鉴定蝴蝶兰与火焰兰远缘杂交后代真杂种的方法。

背景技术

蝴蝶兰(Phalaenopsis)因其花形奇特、花色艳丽、色泽丰富、花序整齐、花期长，素有“洋兰皇后”的美称。蝴蝶兰的杂交育种周期长，从杂交结实、无菌播种、出苗移栽、实生苗开花需要3～4年时间，再到优良单株选择、单株繁殖、出苗移栽、分生苗开花需3～4年，所以一个新品种的育成需6～8年。因此，急需一种能够对杂交后代早期小苗进行杂种真实性鉴定，从而判断杂交组合的真实性鉴定方法。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了一种利用染色体鉴定蝴蝶兰与火焰兰远缘杂交后代真杂种的方法。本发明提供的方法能够对杂交后代早期小苗进行杂种真实性鉴定，从而判断杂交组合的真实性。

为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

本发明提供了一种鉴定蝴蝶兰与火焰兰远缘杂交后代真杂种的方法，包括以下步骤：

取亲本及子代的根尖，分别制成染色体标本，观察染色体数，确定亲本及子代的染色体倍性；当子代与亲本的染色体倍性不同时，则子代为真杂种；

当子代倍性与亲本中的一种或两种相同时，则通过核型分析进行确定，若子代的染色体核型与亲本的核型不同，则子代为真杂种。

优选的，所述亲本或子代染色体数的确定方法包括：染色体标本中的细胞数≥10个，且以85％以上的细胞具有恒定一致的染色体数作为亲本或子代的染色体数。

优选的，所述染色体标本的制备方法包括：取材、预处理、固定、解离和制片；

所述取材包括取亲本及子代新鲜的末端根尖5mm，每株植株取5个根尖。

优选的，所述预处理包括：将取材后得到的根尖浸泡于饱和α-溴萘溶液中，在4℃的环境中静置24h。

优选的，所述固定包括：将预处理后的根尖清洗后浸泡于卡诺氏固定液中，在4℃的环境中静置24h。

优选的，所述解离包括：将固定后的根尖浸泡于1mol/L盐酸中，进行第一解离5～6min；然后将含有根尖的盐酸溶液加热至60℃，进行第二解离6～7min。

优选的，所述第一解离的温度为25～30℃。

优选的，所述制片包括：将解离后的根尖清洗后利用卡宝品红染色8～10min，得到染色体标本。

优选的，所述清洗的溶剂包括超纯水；所述清洗的次数为3～4次。

优选的，所述观察的显微镜倍数包括1000倍。

有益效果：