[发明专利]一种特异性检测丙肝的试剂盒及其制备方法

说明书

一种特异性检测丙肝的试剂盒，它的检测丙肝的抗原为融合蛋白；所述融合蛋白，由丙型肝炎病毒核心蛋白和丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3融合组成。丙型肝炎病毒核心蛋白和丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3通过连接肽连接。所述融合蛋白的氨基酸序列为从N末端至C末端依次由所述丙型肝炎病毒核心蛋白氨基酸序列、连接肽氨基酸序列、丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3氨基酸序列组成；或，所述融合蛋白的氨基酸序列为从N末端至C末端依次由标签蛋白的氨基酸序列、甲硫氨酸、所述丙型肝炎病毒核心蛋白氨基酸序列、连接肽氨基酸序列、丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3氨基酸序列组成。其中的融合蛋白作为抗原，能够灵敏、特异的检测丙肝。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体涉及一种特异性检测丙肝的试剂盒及其制备方法。

背景技术

丙型病毒性肝炎，简称为丙型肝炎、丙肝，是一种由丙型肝炎病毒(HCV)感染引起的病毒性肝炎，主要经输血、针刺、吸毒等传播，据世界卫生组织统计，全球HCV的感染率约为3％，估计约1.8亿人感染了HCV，每年新发丙型肝炎病例约3.5万例。丙型肝炎呈全球性流行，可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化，部分患者可发展为肝硬化甚至肝癌。未来20年内与HCV感染相关的死亡率(肝衰竭及肝细胞癌导致的死亡)将继续增加，对患者的健康和生命危害极大，已成为严重的社会和公共卫生问题。宿主在HCV感染的不同阶段和不同生理条件下，产生的HCV抗体存在差异，可能仅产生某一种抗原的抗体或多种抗原的抗体。因此，抗HCV的检测试剂中因包含多种抗原，可提高检出率。此外，HCV重组抗原作为HCV抗体诊断试剂的主要组成成分，对HCV抗体检测试剂盒的质量、成本都起决定性作用。

发明内容

本发明解决的技术问题是如何灵敏、特异的检测丙肝。

本发明提供一种特异性检测丙肝的试剂盒，它的检测丙肝的抗原为融合蛋白；所述融合蛋白，由丙型肝炎病毒核心蛋白和丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3融合组成。

可选的，丙型肝炎病毒核心蛋白和丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3通过连接肽连接。

可选的，所述融合蛋白的氨基酸序列为从N末端至C末端依次由所述丙型肝炎病毒核心蛋白氨基酸序列、连接肽氨基酸序列、丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3氨基酸序列组成；

或，

所述融合蛋白的氨基酸序列为从N末端至C末端依次由标签蛋白的氨基酸序列、甲硫氨酸、所述丙型肝炎病毒核心蛋白氨基酸序列、连接肽氨基酸序列、丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3氨基酸序列组成。

可选的，所述丙型肝炎病毒核心蛋白氨基酸序列为SEQ ID.No.2第2-172位；其编码DNA分子的核苷酸序列为SEQ ID No.1(5’-3’)第4-516位；

丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3氨基酸序列为SEQ ID.No.2第182-555位；其编码DNA分子的核苷酸序列为SEQ ID No.1(5’-3’)第544-1665位；

连接肽氨基酸序列为SEQ ID.No.2第173-181位；其编码DNA分子的核苷酸序列为SEQ ID No.1(5’-3’)第517-543位；

标签蛋白为MBP标签。

本发明提供一种特异性检测丙型肝炎的试纸条，包括：胶体金吸附垫和承载膜；所述胶体金吸附垫上承载胶体金标记的检测丙肝的抗原和胶体金标记的兔IgG；所述承载膜上设置有相间隔的检测线T和质控线C，所述检测线T包被检测丙肝的抗原；所述检测丙肝的抗原为融合蛋白，其氨基酸序列从N末端至C末端依次由标签蛋白的氨基酸序列、甲硫氨酸、丙型肝炎病毒核心蛋白氨基酸序列、连接肽氨基酸序列、丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3氨基酸序列组成。

可选的，所述丙型肝炎病毒核心蛋白氨基酸序列为SEQ ID.No.2第2-172位；所述丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3氨基酸序列为SEQ ID.No.2第182-555位。