[发明专利]贵金属掺杂的金属有机框架复合材料在检测河豚毒素中的应用、河豚毒素的检测方法

说明书

本发明涉及河豚毒素的检测技术领域，尤其涉及贵金属掺杂的金属有机框架复合材料在检测河豚毒素中的应用、河豚毒素的检测方法。本发明提供了贵金属掺杂的金属有机框架复合材料在检测河豚毒素中的应用，贵金属掺杂的金属有机框架复合材料包括金属有机框架和掺杂在所述金属有机框架多孔结构中的贵金属纳米颗粒；检测河豚毒素的方法为荧光检测或表面增强拉曼检测；检测河豚毒素的过程中，以Cy3荧光染料标记的河豚毒素适配体为识别元件。所述贵金属掺杂的金属有机框架复合材料可以提高对河豚毒素的检测灵敏性和准确性，同时还可以实现检测手段的多样性，应用性较好。

技术领域

本发明涉及河豚毒素的检测技术领域，尤其涉及贵金属掺杂的金属有机框架复合材料在检测河豚毒素中的应用、河豚毒素的检测方法。

背景技术

河豚毒素(TTX)是一种典型低分子量(319Da)的高毒性神经毒素，其广泛存在于河豚鱼和某些海洋动物中。TTX可高选择性和高亲和性地结合神经细胞膜上电压门控钠离子通道的受体，阻碍钠离子透过细胞膜传导神经的冲动，从而引起神经麻痹、呼吸衰竭，甚至死亡。TTX的化学性质和热性质均很稳定，一般烹调手段不能将其破坏，只有在高温加热30min以上或在碱性条件下才能被分解。如果含有TTX的食物处理不当，而摄入TTX污染的食物，TTX在0.5～3mg的低剂量下即可导致成年人中毒死亡，其毒性比氰化物高近1200倍，严重危害生命安全。因此，有必要开发一种高灵敏、准确的食品中TTX检测方法。

目前，食品安全国家标准水产品中河豚毒素的测定方法有小鼠生物法、液相色谱-串联质谱法、液相色谱-荧光检测法和酶联免疫吸附法。其中，小鼠生物法利用TTX毒性特点实现检测，方法设计简单，结果直观，但检测效率低、实验耗时长且劳动强度大；仪器分析法(液相色谱-串联质谱法、液相色谱-荧光检测法)具有较高的灵敏度和准确性，但是需要专业的技术人员和昂贵的仪器设备；免疫分析法(酶联免疫吸附法)具有较好的特异性，但抗体成本高且操作步骤繁琐。

针对上述问题，近年来多种检测TTX的新方法也不断涌现，如表面等离子体共振法、荧光传感器检测方法和电化学传感器检测方法等。这些检测方法虽然满足灵敏检测的需求，但大多数是以抗体或适配体为特异性识别分子，它们都需要复杂而繁琐的生物分子固定化或修饰过程才能获得特异性的结合响应信号，其低固定化效率会降低方法的检测性能。更重要的是，绝大多数已报道的检测技术主要是基于单一方法的检测模式，检测手段较为单一，广泛应用性较差。

发明内容

本发明的目的在于提供贵金属掺杂的金属有机框架复合材料在检测河豚毒素中的应用、河豚毒素的检测方法。所述贵金属掺杂的金属有机框架复合材料可以提高对河豚毒素的检测灵敏性和准确性，同是还可以实现检测手段的多样性，应用性较好。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种贵金属掺杂的金属有机框架复合材料在检测河豚毒素中的应用，所述贵金属掺杂的金属有机框架复合材料包括金属有机框架和掺杂在所述金属有机框架多孔结构中的贵金属纳米颗粒；

所述金属有机框架包括MIL-101、MIL-88B、ZIF-8或UIO-66；

所述贵金属纳米颗粒包括金纳米颗粒、银纳米颗粒、铜纳米颗粒或金银合金纳米颗粒；

所述检测河豚毒素的方法为荧光检测或表面增强拉曼检测；

所述检测河豚毒素的过程中，以Cy3荧光染料标记的河豚毒素适配体为识别元件。

优选的，所述贵金属纳米颗粒与金属有机框架复合材料的质量比为(1.4～4.2)：1。

本发明还提供了一种河豚毒素的检测方法，包括以下步骤：

将Cy3荧光染料标记的河豚毒素适配体和Tris-HCl缓冲液混合，得到Cy3-适配体溶液；