[发明专利]一种高靶向低毒性肿瘤微环境智能响应型纳米载体及其制备方法

权利要求书

1.一种高靶向低毒性肿瘤微环境智能响应型纳米载体，其特征在于，所述纳米载体由多嵌段聚合物在水中自组装形成的胶束组成，所述多嵌段聚合物为“二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺(DSPE)-SS-聚乙二醇(PEG)-聚β氨基酯(PAE)-靶向基团，其亲水端为PEG，疏水端为DSPE通过二硫键连接；所述亲水端连接带有靶向基团的pH响应嵌段PAE。

2.根据权利要求1所述的一种高靶向低毒性肿瘤微环境智能响应型纳米载体，其特征在于，所述胶束在中性环境中粒径为30-200nm，酸性环境中粒径变大。

3.根据权利要求1所述的一种高靶向低毒性肿瘤微环境智能响应型纳米载体，其特征在于，所述靶向基团为肿瘤新生血管靶向肽c(RGDyc)，其氨基酸序列为Ary-Gly-Asp-D-Tyr-Cys。

4.根据权利要求1所述的一种高靶向低毒性肿瘤微环境智能响应型纳米载体，其特征在于，所述纳米载体为式Ⅰ所述结构聚合物，

其中n≥2，x≥2。

5.根据权利要求4所述的一种高靶向低毒性肿瘤微环境智能响应型纳米载体，其特征在于，所述的嵌段聚合物为一整条长链，n在30-100之间,x在8-15范围内。

6.权利要求1-5中任意一项所述高靶向低毒性肿瘤微环境智能响应型纳米载体的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

1)HO-PEG-SS-NH₂的合成

取1-50份HO-PEG-COOH、1-80份NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)、1-60份DCC(二环己基碳二酰亚胺)、0.1-30份DMAP(4-二甲氨基吡啶)溶解在含有DMF(N,N-二甲基甲酰胺)的三口瓶中，在N₂保护的条件下冰水浴反应3-8h，用以活化羧基；

称取1-800份的胱胺盐酸盐与1-1500份的三乙胺溶于DMF中，用以除盐；将溶有胱胺的DMF缓慢地滴入三口瓶中，在N₂保护条件下室温反应18-36h；反应结束后经冰乙醚沉淀，真空干燥获得式Ⅱ所述结构聚合物，式Ⅱ所述结构聚合物缩写为HO-PEG-SS-NH₂；

其中，n≥2；

2)DSPE-SS-PEG-OH的合成

取上述所合成的1-40份OH-PEG-SS-NH₂、1-45份DCC、1-40份DSPE-COOH(二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺改性羧基)、1-35份NHS溶于氯仿中，在室温条件下反应2-6h，反应结束后用水洗涤反应液，经无水硫酸钠干燥，旋蒸除去溶剂，粗品过阴离子交换柱经氨水洗脱得到式Ⅲ所述结构聚合物，式Ⅲ所述结构聚合物缩写为DSPE-SS--PEG-OH；

其中，n≥2；

3)DSPE-SS-PEG-AC的合成

取上述所合成的1-30份DSPE-SS-PEG-OH、1-60份三乙胺、1-50份丙烯酰氯冰浴条件下溶于二氯甲烷中，室温条件反应2-6小时后，反应结束后过滤除去白色沉淀，滤液以1mol/L稀盐酸萃取三次，有机相加入无水硫酸钠和碳酸钠经过滤后得到式Ⅳ所述结构聚合物，式Ⅳ所述结构聚合物缩写为DSPE-SS-PEG-AC；

其中，n≥2；

4)DSPE-SS-PEG-PAE-NHS的合成

取上述所合成的1-20份DSPE-SS-PEG-AC、1-600份1,6-己二醇二丙烯酸酯(HDD)、1-480份1,3-二(4-哌啶基)丙烷(TDP)溶于二氯甲烷中，在N₂保护的条件下30-60℃反应2-4天，再加入1-45份N-丙烯酰氧基琥珀酰亚胺反应18-36h，经乙醚沉淀后即得式Ⅴ所述结构聚合物，式Ⅴ所述结构聚合物缩写为DSPE-SS-PEG-PAE-NHS；

其中，n≥2，x≥2；

5)DSPE-SS-PEG-PAE-cRGD的合成

取上述所合成的1-15份DSPE-SS-PEG-PAE-NHS、1-40份c(RGDyc)、1-50份三乙胺溶解在氯仿和DMSO的混合溶液中，20-50℃条件下反应8-10h，结束后旋蒸除去氯仿，在超纯水中透析，每天换水3-5次，透析三天后，冷冻干燥即可得式Ⅰ所述结构聚合物，式Ⅰ所述结构聚合物缩写为DSPE-SS-PEG-PAE-cRGD。