[发明专利]一种高靶向低毒性肿瘤微环境智能响应型纳米载体及其制备方法

说明书

本发明公开了一种高靶向低毒性肿瘤微环境智能响应型纳米载体及其制备方法，是由粒径为30‑200nm的胶束组成，所述的胶束是由多嵌段聚合物在水中自组装而成。多嵌段聚合物含有疏水端DSPE以及亲水端PEG，在亲水端PEG上偶联酸响应嵌段PAE以及肿瘤血管靶向肽。在中性PH的血液环境中PAE是疏水的，可以将c(RGDyc)包藏在胶束中，避免c(RGDyc)与血液中的调理素相作用，减少网状内皮系统的清除。同时所述胶束的亲水端PEG以及疏水端DSPE通过二硫键相连接，在肿瘤细胞中受到谷胱甘肽还原性的影响，二硫键断裂将药物释放，杀伤肿瘤细胞。增强了肿瘤细胞对载体的内吞，防止胶束从肿瘤组织中外逃。由于二硫键在肿瘤组织内还原响应，特异性释放化疗药物减少化疗药物的毒副作用。

技术领域

本发明属于生物医药和纳米医学技术领域，特别的是一种高靶向低毒性的智能响应型纳米载体。

背景技术

癌症是一种影响人类健康的恶性疾病，近三十年来，世界癌症发病率以每年3％-5％的速度增加，严重危害人们的身心健康。目前，手术、放疗和化疗是临床癌症治疗的主要方法。传统的抗肿瘤药物选择性差，杀死肿瘤细胞的同是也杀伤正常细胞，并且普遍存在溶解性低、半衰期短等问题。

纳米药物载体在输送药物的过程中面临诸多的障碍，会在体内经历一个复杂的过程：1)在血液中循环并且停留较长的时间2)当药物到达肿瘤组织后，会在肿瘤组织中蓄积(EPR效应)3)纳米药物在肿瘤组织中渗透到达肿瘤细胞4)快速地进入肿瘤细胞中5)在肿瘤细胞内快速将药物释放。例如，一些药物载体表面修饰亲水性较好的聚合物以避免网状内皮系统的快速清除，获得较好的长循环性能并提高肿瘤部位的富集量。但是研究表明，这些载体不易被肿瘤细胞内吞，降低肿瘤治疗效果。于此同时，一些具有良好应用前景的靶向药物载体具有良好的肿瘤细胞内吞能力。陈等人[陈王彦.RGD肽介导PEG-DSPE胶束及其肿瘤靶向作用的研究.上海中医药大学,2013.]设计了靶向肽连接DSPE-PEG嵌段，靶向治疗肿瘤。但c(RGDyc)直接暴露在纳米粒子的表面，易于与血液中的调理素相互作用，使得纳米粒子在调理素作用下，促使其被网状内皮系统快速清除，并可能会引起免疫反应，大大降低了纳米药物的抗肿瘤疗效。

目前解决长循环和细胞内吞的研究主要集中于亲疏水转变以及靶向基团的隐藏。这种纳米载体进入血液循环后，利用载体表面的亲水材料增加载体在血液循环中的循环时间，减少网状内皮系统对载体的清除作用，提高生物利用度。同时利用肿瘤微环境不同于正常组织将靶向基团暴露，增强肿瘤细胞对载体的内吞作用。高等人(高红军.功能协同的复合胶束作为抗肿瘤纳米药物载体的研究[D].南开大学,2014.)利用PEG-PCL与RGD-PAE-PCL两种嵌段聚合物组合成为混合胶束。在血液环境中，亲水的PEG发生长循环的作用，当到达肿瘤组织后PAE发生亲疏水转换暴露出靶向基团，发挥嵌段聚合物的靶向作用。但同时混合胶束的制备工艺复杂，需要进行大量试验摸索嵌段聚合物的比例。

发明内容

本发明在高等人的思路上，基于现有的背景，为简化混合胶束的制备工艺，创造性地利用丙烯酰氯修饰PEG，合成了一种未经报导的聚合物长链，将带有RGD的酸响应嵌段PAE与PEG连接。同时利用磷脂作为嵌段聚合物的疏水端，具有良好的生物相容性。长链聚合物利用亲疏水转换材料PAE、靶向基团c(RGDyc)，通过二硫键连接合成了聚合物用以形成胶束。可以同时实现良好的生物相容性和靶向肿瘤，到达肿瘤细胞内特异性释放化疗药物，表现出对肿瘤细胞较高的靶向性以及杀伤作用。

为了实现该方案，本发明的技术方案为：一种具有包藏靶向配体，对肿瘤组织具有高靶向的还原响应型载体，其结构式为：

其中n≥2，x≥2；

式Ⅰ所述的化合物为cRGD-PAE-PEG-SS-DSPE，中文名为cRGD-聚β氨基酯-聚乙二醇-SS-二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺，所述的嵌段聚合物为一整条长链,其中n≥2，x≥2进一步优选为n在30-100、x在8-15范围内，作为一整条聚合物可以快速酸响应。