[发明专利]一种铁蛋白检测试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种铁蛋白检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒由第一试剂、第二试剂和铁蛋白校准品组成，

所述第一试剂包括：第一溶液及第一防腐剂；

所述第二试剂包括：第二溶液、第二防腐剂及偶联抗人铁蛋白抗体的胶乳微球；所述抗人铁蛋白抗体是抗人铁蛋白单克隆抗体或抗人铁蛋白多克隆抗体。

2.根据权利要求1所述的铁蛋白检测试剂盒，其特征在于，所述第一试剂中的第一溶液的成分为甘氨酸50-100mM，氯化钠1.8％-4.5％，蛋白保护剂0.5％-2.0％，牛血清白蛋白0.25％-2.0％，表面活性剂0.05％-0.5％，且第一溶液的pH为7.5-8.0；所述第一试剂中的第一防腐剂选自叠氮钠、Proclin系列中的至少一种，其浓度为0.1％-0.5％。

3.根据权利要求1所述的铁蛋白检测试剂盒，其特征在于，所述第二试剂中的第二溶液的成分为：MES 12.5mM，甘氨酸50-100mM，牛血清白蛋白0.5％-1.5％，蛋白保护剂2.0％-4.0％；

所述第二防腐剂选自叠氮钠、Proclin系列中的至少一种，浓度为0.1％-0.5％；

所述胶乳微球为羧基修饰的聚苯乙烯微球，微球粒径为200-350nm，浓度为0.1％-0.2％。

4.根据权利要求1所述的铁蛋白检测试剂盒，其特征在于，所述铁蛋白校准品为用校准品稀释液将铁蛋白稀释至0-1000ng/ml。

5.根据权利要求4所述的铁蛋白检测试剂盒，其特征在于，所述校准品稀释液的成分为：HEPES 25-50mM，氯化钠0.9％-2.7％，表面活性剂0.5％-1.0％，蛋白保护剂0.5％-1.0％，牛血清白蛋白1.5％-3.0％，第三防腐剂；

所述蛋白保护剂选自蔗糖、海藻糖中的一种；

所述表面活性剂选自Brij-35、Tween 20、Triton X100中的至少一种；

所述第三防腐剂选自叠氮钠、Proclin系列中的至少一种，浓度为0.1％-0.5％。

6.一种权利要求1-5所述铁蛋白检测试剂盒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：取胶乳微球溶于pH 6.5的25mM MES溶液中，加入EDC搅拌后离心弃去上清，沉淀重悬并超声分散后加入抗人铁蛋白抗体，搅拌后加入保存液，超声分散后置于37℃10-16h即得。

7.根据权利要求6所述的铁蛋白检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述保存液的成分为：甘氨酸100-200mM，牛血清白蛋白1.0％-3.0％，蛋白保护剂4.0％-8.0％，第二防腐剂0.2％-1.0％，pH 7.1。

8.根据权利要求6所述的铁蛋白检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述EDC的用量按摩尔量计为取用胶乳微球表面羧基摩尔量的15-35倍。

9.根据权利要求6所述的铁蛋白检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述离心的设置条件为9000rpm，10min。

10.根据权利要求6所述的铁蛋白检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述超声的设置条件为30％-40％功率，10min。

11.根据权利要求6所述的铁蛋白检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述抗人铁蛋白抗体的用量按质量计为取用胶乳微球质量的0.035-0.045倍。