[发明专利]3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症检测装置及有机酸检测方法

权利要求书

1.一种尿液有机酸含量检测方法，其特征在于，包括：

建立待检测有机酸的标准曲线，所述待检测有机酸包括：3-甲基巴豆酰甘氨酸和3-羟基异戊酸；

确定所述待检测有机酸的特征离子；

对尿液样品进行前处理；

通过气相色谱-质谱联用的方法，定量检测所述前处理后的尿液样品中待检测有机酸的含量；

其中，所述质谱的扫描模式为“单离子检测”的特征离子扫描模式，采集的离子信号为3-甲基巴豆酰甘氨酸和3-羟基异戊酸的特征离子。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述对尿液样品进行前处理，具体包括：

向所述尿液样品中加入尿素酶，以去除尿液样品中的尿素；

在所述去除尿素后的尿液样品中加入盐酸羟胺，进行肟化反应；

在所述肟化反应后，萃取所述尿液样品中的有机酸；

在萃取的有机酸干燥后，加入硅烷化试剂进行硅烷化反应。

3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述萃取所述尿液样品中的有机酸，具体包括：

向所述尿液样品加入预定量的乙酸乙酯后，振荡混匀；

在振荡混匀后，以预设的离心转速进行离心；

获取离心后的上清液。

4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，在所述获取离心后的上清液的步骤之后，所述方法还包括：

将所述上清液放置在氮吹仪上，通入氮气吹干所述上清液。

5.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，在所述肟化反应后，重复执行所述萃取所述尿液样品中的有机酸的步骤至少两次，以使所述尿液样品的有机酸提取率达到预设的目标值。

6.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述硅烷化试剂为BSTFA:TMCS(99:1)。

7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述气相色谱的工作条件具体如下：

进样方式：分流模式；

分流比：10:1

进样口温度：280℃；

升温程序：140℃保持1分钟，以6℃/分钟的升温速率升至200℃，保持2分钟；

流量控制模式：恒线速度。

8.根据权利要求7所述的检测方法，其特征在于，所述质谱的工作条件具体如下：

离子源温度：200℃；

接口温度：280℃；

采样方式：单离子检测；

间隔：0.30s；

扫描速度：1000；

采集质荷比：247，205，286，184。

9.如权利要求1-8任一项所述的尿液有机酸含量检测方法在3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症检测中的应用。

10.一种3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症检测装置，其特征在于，包括：

存储器，用于存储3-甲基巴豆酰甘氨酸和3-羟基异戊酸的标准曲线；

样品处理试剂盒，所述样品处理试剂盒包括：若干种用于对尿液样品进行前处理的试剂以及离心管；

气相色谱-质谱设备，用于通过气相色谱-质谱联用的方法，定量检测所述前处理后的尿液样品中待检测有机酸的含量；

其中，所述质谱的扫描模式为“单离子检测”的特征离子扫描模式，采集的离子信号为3-甲基巴豆酰甘氨酸和3-羟基异戊酸的特征离子。