[发明专利]3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症检测装置及有机酸检测方法

说明书

本发明实施例提供了3‑甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症检测装置、尿液有机酸含量检测方法及其应用。其检测方法包括：建立3‑甲基巴豆酰甘氨酸和3‑羟基异戊酸的标准曲线；确定所述待检测有机酸的特征离子；对尿液样品进行前处理；通过气相色谱‑质谱联用的方法，定量检测所述前处理后的尿液样品中待检测有机酸的含量；其中，所述质谱的扫描模式为“单离子检测”的特征离子扫描模式，采集的离子信号为3‑甲基巴豆酰甘氨酸和3‑羟基异戊酸的特征离子。其优化了检测的过程，有效的将检测时间缩短为20分钟并且能够排除数据误解读而造成的误判，具有良好的应用前景。

【技术领域】

本发明涉及体外检测技术领域，尤其涉及一种3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症检测装置、尿液有机酸含量检测方法及其在3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症检测中的应用。

【背景技术】

3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症(3-methylcrotonyl coenzyme Acarboxylasedeficiency，MCCD)是一种常染色体隐性遗传有机酸尿症。

其致病机理是由于细胞内3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶(3-methylcrotonyl-coenzymeAcarboxylase,MCC)缺陷导致3-甲基巴豆酰辅酶A堆积。

堆积的3-甲基巴豆酰辅酶A与甘氨酸结合生成3-甲基巴豆酰甘氨酸(3-MCC)，或者与左旋肉碱结合生成3-羟基异戊酸(3-HIVA)，进而导致3-甲基巴豆酰甘氨酸与3-羟基异戊酸在体内堆积而致病。

患者的临床表现差异较大，可从无症状到严重的代谢紊乱甚至死亡，主要分为无症状型；母源性MCCD型以及症状型三种。三种临床表型的具体情况如下：

1、无症状型(良性MCCD)：患者无任何症状，尿中3-甲基巴豆酰甘氨酸、3-羟基异戊酸轻度增高或正常。

2、母源性MCCD型：母亲多无症状通过乳汁或胎盘传递给新生儿3-羟基异戊酰肉碱，尿中3-甲基巴豆酰甘氨酸、3-羟基异戊酸轻度增高或正常。

3、症状型：患儿出生后3个月至5岁左右因感染、高蛋白饮食等诱发症状。临床症状无特异性，类似Reye综合征，喂养困难，生长发育迟缓，呕吐，腹泻，脑水肿，抽搐，反射亢进，肌张力增高或低下，嗜睡，昏迷等。尿中3-甲基巴豆酰甘氨酸、3-羟基异戊酸特异性明显增高。

由于3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症临床三种表型差异大，并且症状型的尿中3-甲基巴豆酰甘氨酸、3-羟基异戊酸特异性明显增高。因此，对3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症患者体内3-甲基巴豆酰甘氨酸、3-羟基异戊酸含量检测在实际临床应用中显得尤为重要。

现有检测3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症患者体内3-甲基巴豆酰甘氨酸、3-羟基异戊酸主要采用半定量的检测方法。其得到的半定量结果是一种介于定性与定量之间的检测数据，只能对检测物质定性无法准确计量待测物含量。

而且，现有采用气相色谱-质谱联用的检测方法，进行一个尿液样本的有机酸含量检测至少需要一个小时，检测通量较低的同时，得到的检测数据的解读难度较大，容易出现假阳性的结果。

由此，迫切需要提供一种能够快速、准确定量患者体内贮积的3-甲基巴豆酰甘氨酸、3-羟基异戊酸含量来帮助确诊患者临床表型，避免症状性3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症患者急性发病，对身体造成不可逆的损害。

【发明内容】

本发明实施例提供一种3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症检测装置、尿液有机酸含量检测方法及其在3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症检测中的应用，旨在解决现有技术中的3-甲基巴豆酰甘氨酸、3-羟基异戊酸含量检测所存在的一个或多个缺陷。

为解决上述技术问题，本发明实施例提供以下技术方案：一种尿液有机酸含量检测方法。其中，该检测方法包括如下步骤：