[发明专利]蛋白质纯化方法

权利要求书

1.一种蛋白质纯化方法，其特征在于，所述方法包括：

将待纯化的蛋白质样品的pH值调节至第一pH值；

将所述蛋白质样品加载于阳离子层析柱；和

采用包括第一缓冲液和第二缓冲液的洗脱剂进行线性梯度洗脱，所述第一缓冲液的pH值为所述第一pH值，

其中，所述蛋白质的等电点＝第一pH值+n，n为1至2。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第一pH值为5.0至6.8，优选为5.5至6.5，

更优选地，所述第一缓冲液选自10～100mM磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液、10～100mM磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲液或10～100mM柠檬酸-磷酸-Tris缓冲液。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述第二缓冲液的pH值大于所述蛋白质的等电点，

优选地，所述第二缓冲液选自10～100mM磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液、10～100mM磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲液或10～100mM柠檬酸-磷酸-Tris缓冲液。

4.根据权利要求1至3中任一项的方法，其特征在于，所述蛋白质的等电点为6.5至8.0，

优选地，所述蛋白质为融合蛋白或单克隆抗体，更优选为单特异性抗体或双特异性抗体。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其特征在于，所述阳离子层析柱的填料包括含磺酸基、磺丙基、磷酸基、羧甲基、羧基官能团的阳离子交换剂，优选为含磺丙基的阳离子交换剂。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其特征在于，在所述将待纯化的蛋白质样品的pH值调节至第一pH值之前，所述方法进一步包括对所述待纯化的蛋白质样进行亲和层析，

优选地，所述亲和层析的亲和介质为蛋白A。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其特征在于，在所述将待纯化的蛋白质样品的pH值调节至第一pH值之前，所述方法进一步包括对所述待纯化的蛋白质样进行阴离子层析，

优选地，所述阴离子层析的填料包括Q-琼脂糖，含季氨乙基或季胺官能团的树脂。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其特征在于，在将所述蛋白质样品加载于阳离子层析柱之前，所述方法进一步包括采用所述第一缓冲液对所述阳离子层析柱进行平衡。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其特征在于，在进行线性梯度洗脱之前，所述方法进一步包括采用所述第一缓冲液对所述阳离子层析柱进行再平衡。

10.一种通过如权利要求1至9中任一项所述的方法获得的经纯化的蛋白质。