[发明专利]一种利用山核桃饼粕制备山核桃蛋白的方法

权利要求书

1.一种利用山核桃饼粕制备山核桃蛋白的方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一、山核桃饼粕预处理

将山核桃饼粕烘干，利用粉碎机将烘干的山核桃饼粕以30000～35000r/min粉碎4～7s，粉碎物料过40～60目筛，弃去筛下物，将筛上物以30000～35000r/min粉碎35～40s，将粉末过80～100目筛，弃去筛上物，筛下物作为制备山核桃蛋白的原料；

步骤二、酶辅助碱提取

将步骤一得到的山核桃蛋白原料按照料液比1g:15ml～1g:25ml的比例加水，调节溶液pH至10.0～10.5，以山核桃蛋白原料质量为基准，按照1000～1500U/g的量添加碱性蛋白酶，在55～60℃条件下恒温搅拌提取1～6h，其中，在0.5～1h时再次调节溶液pH至10.0～10.5，提取完成后离心，弃去上层乳化层，收集中间水层；将下层沉淀残渣收集起来，以山核桃蛋白原料质量为基准，再次按照料液比1g:15ml～1g:25ml的比例向沉淀残渣中加水，调节溶液pH至10.0～10.5，在55～60℃条件下恒温搅拌洗渣15～30min，洗渣完成后离心，弃去上层乳化层和下层沉淀，收集中间水层；将第一次与第二次离心得到的中间水层合并，得到山核桃蛋白提取液；

步骤三、糖化酶酶解纯化

将步骤二得到的山核桃蛋白提取液pH调节至4.0～4.5，以山核桃蛋白原料质量为基准，按照100～130U/g的量向山核桃蛋白提取液中添加糖化酶，在55～65℃条件下恒温搅拌酶解2～6h，酶解完成后，灭酶，冷却至室温后调节酶解液pH至3.5～4.0，静置60～120min后离心，弃去上清液，收集沉淀，得到山核桃提取蛋白粗提物；

步骤四、乙醇水溶液洗脱除杂

以山核桃蛋白原料质量为基准，按照料液比为1g:12ml～1g:15ml的比例向步骤三得到的山核桃提取蛋白粗提物中加入75％～85％v/v的乙醇水溶液，在50～60℃条件下恒温搅拌洗脱45～90min，洗脱完成后离心，弃去上清液，收集下层沉淀，加入5～8倍体积的水将沉淀复溶，调节溶液pH至7.0，得到山核桃蛋白溶液；

步骤五、蛋白质喷雾干燥

将步骤四得到的山核桃蛋白溶液喷雾干燥，得到山核桃蛋白粉即为所述山核桃蛋白。

2.根据权利要求1所述的利用山核桃饼粕制备山核桃蛋白的方法，其特征在于，步骤一将山核桃饼粕在40～50℃烘箱中烘12～24h。

3.根据权利要求1所述的利用山核桃饼粕制备山核桃蛋白的方法，其特征在于，步骤二利用35％～45％w/v氢氧化钠溶液调节pH，步骤三利用8％～12％v/v盐酸溶液调节pH，步骤四利用35％～45％w/v氢氧化钠溶液调节pH。

4.根据权利要求1所述的利用山核桃饼粕制备山核桃蛋白的方法，其特征在于，步骤二提取完成后在3800～4000r/min条件下离心15～20min，洗渣完成后在3800～4000r/min条件下离心15～20min；步骤三静置60～120min后，以1500～2000r/min条件离心5～10min；步骤四洗脱完成后以1500～2000r/min条件离心5～10min。

5.根据权利要求1所述的利用山核桃饼粕制备山核桃蛋白的方法，其特征在于，步骤三85～90℃灭酶10～15min。

6.根据权利要求1所述的利用山核桃饼粕制备山核桃蛋白的方法，其特征在于，步骤五将喷雾干燥机进口温度调至150～180℃，蠕动泵转速调至2～5r/min，在此条件下将步骤四得到的山核桃蛋白溶液喷雾干燥。

7.权利要求1-6任一权利要求制备的山核桃蛋白在作为制备活性肽原料中的应用。

8.权利要求1-6任一权利要求制备的山核桃蛋白在作为食品加工用植物蛋白添加剂中的应用。

9.权利要求1-6任一权利要求制备的山核桃蛋白在作为功能性食品配料中的应用。

10.权利要求1-6任一权利要求制备的山核桃蛋白在作为畜牧业蛋白补充饲料中的应用。