[发明专利]用于γδT的细胞扩增培养基、组合产品及其培养方法

权利要求书

1.杀伤活性调高的γδT细胞培养方法，其特征在于，包括：

b）将γδT细胞用γδT细胞扩增培养基进行培养；

所述γδT细胞扩增培养基由基础培养基以及附加组分组成，所述附加组分的组成如下：5%~15%（v/v） FBS、IL2 200 IU/mL~800 IU/mL、IL21 1ng/mL~20ng/mL、辅酶Q10 5μmol/L~20μmol/L和维生素C 5μmol/L~20μmol/L。

2. 根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述附加组分的组成如下：7%~13%（v/v） FBS、IL2 400 IU/mL ~ 600 IU/mL、IL21 7ng/mL~13ng/mL以及辅酶Q10 7μmol/L~13μmol/L。

3.根据权利要求1或者2所述的培养方法，其特征在于，所述基础培养基为Optivitro培养基。

4.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，在b）之前还包括步骤a）：用γδT细胞激活培养基对γδT细胞进行预培养；

所述γδT细胞激活培养基的组成为：5%~15%（v/v） FBS、IL2 200 IU/mL ~ 800 IU/mL、IL21 1 ng/mL ~ 20 ng/mL以及双膦酸盐 1μM ~ 10μM。

5.根据权利要求4所述的培养方法，其特征在于，所述双膦酸盐包括唑来膦酸、依替膦酸、伊班膦酸、帕米膦酸、阿仑膦酸、利塞膦酸、米罗磷酸中的一种或多种。

6.根据权利要求4所述的培养方法，其特征在于，所述预培养的细胞为外周血单个核细胞，接种密度为（2~3）×10⁶/mL。

7.根据权利要求6所述的培养方法，其特征在于，所述预培养的时间为2~4天。

8.根据权利要求1、2以及4~7任一项所述的培养方法，其特征在于，步骤b）起始培养的细胞接种密度为（1~2）×10⁶/mL。

9.根据权利要求8所述的培养方法，其特征在于，在步骤b）中，每隔2~3天对细胞进行换液。

10.权利要求1~9任一项所述的方法在制备嵌合性抗原受体γδT细胞中的应用。