[发明专利]一种多主棒孢菌分生孢子质量的测定方法

权利要求书

1.一种多主棒孢菌分生孢子质量的测定方法，包括如下步骤：

S1、将供试多主棒孢菌菌株进行活化和扩繁，利用粘附材料粘取多主棒孢菌分生孢子，利用差值法得到多主棒孢菌孢子粉的质量；

S2、配制多主棒孢菌分生孢子悬浮液；

S3、吸取所述多主棒孢菌分生孢子悬浮液并滴加至血球计数板的表面，在光学显微镜下统计计数区多主棒孢菌分生孢子的数量，按照下述式(1)得到单个孢子的质量：

2.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于：步骤S1中，在如下条件下进行活化：

在马铃薯葡萄糖琼脂培养基上进行，于28℃黑暗培养5天；

在如下条件下进行扩繁：

在28℃、波长为265nm、高度为50cm的紫外光下照射培养10天。

3.根据权利要求1或2所述的测定方法，其特征在于：步骤S1中，所述粘附材料为称量纸；

所述称量纸的大小为3～3.5cm×1～1.5cm。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的测定方法，其特征在于：步骤S1中，按照下述方法得到多主棒孢菌孢子粉的质量：

将粘附有多主棒孢菌分生孢子的所述粘附材料置于无菌离心管中，然后进行离心；所述离心结束后，称量所述离心管和所述多主棒孢菌孢子粉的总质量，进而得到所述多主棒孢菌孢子粉的质量。

5.根据权利要求4所述的测定方法，其特征在于：所述离心的条件为：

转速为8000～12000rpm，时间为1～2min。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的测定方法，其特征在于：步骤S2中，采用体积含量为70％的乙醇水溶液配制所述多主棒孢菌分生孢子悬浮液。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的测定方法，其特征在于：步骤S2中，配制所述多主棒孢菌分生孢子悬浮液的过程中，添加研磨珠进行涡旋振荡；

所述研磨珠的直径为1～3mm，每个离心管中添加6～10粒所述研磨珠，涡旋振荡时间为3～5s。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的测定方法，其特征在于：步骤S3中，所述光学显微镜的放大倍数为100倍；

所述血球计数板计数区所述多主棒孢菌分生孢子的数量为随机进行10次取样的平均值。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的测定方法，其特征在于：步骤S3中，当所述多主棒孢菌分生孢子悬浮液的密度为1mg/mL，计数区体积为0.1mm³时，按照式(2)得到单个孢子的质量：