[发明专利]一种利用转基因大豆生产α-淀粉酶的方法及表达载体

权利要求书

1.一种利用转基因大豆生产α-淀粉酶的方法，其特征在于所述方法是将含α-淀粉酶表达框的表达载体导入大豆基因组中，获得能够在大豆种子中表达α-淀粉酶的转基因大豆；所述α-淀粉酶表达框包括启动子、α-淀粉酶编码基因、终止子。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述α-淀粉酶表达框的启动子能够启动α-淀粉酶在种子中高水平表达。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于所述启动子为核苷酸序列为SEQ ID NO:1、SEQID NO:2、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:4中的一种。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述α-淀粉酶编码基因核苷酸序列为下列之一所示：SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述终止子为花椰菜花叶病毒35s终止子或拟南芥heat shock protein 18.2基因终止子。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述表达载体还包括筛选标记基因表达框，所述筛选标记基因表达框为耐草甘膦表达框、耐草铵膦表达框或耐啶嘧磺隆表达框。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于所述耐啶嘧磺隆表达框中啶嘧磺隆抗性基因CdP450的核苷酸序列如SEQ ID NO:21所示。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于使用核苷酸序列如SEQ ID NO:18所示的烟草蚀纹病毒5'非翻译区TEV 5'UTR编码基因、核苷酸序列如SEQ ID NO:19所示的拟南芥2S白蛋白信号肽编码基因和核苷酸序列如SEQ ID NO:20所示的烟草Tobacco RB7核基质结合区调控序列来增强α-淀粉酶基因的表达。

9.一种用于权利要求1所述方法的表达载体。

10.一种权利要求1所述方法构建的转基因植物细胞。