[发明专利]具有抗肿瘤活性的三环二萜类化合物及其制备方法与应用

说明书

本发明公开了从京大戟分离得到的具有抗肿瘤活性的三环二萜类化合物新化合物及其制备方法。体外抗肿瘤活性研究表明，本发明提供的三环二萜类化合物对包括淋巴瘤、结肠癌或白血病等肿瘤细胞均具有很强的抗肿瘤活性，可开发成新的抗肿瘤药物。本发明提供的制备方法工艺设计合理，原料易得，成本低，推广性强。

技术领域

本发明涉及具有抗肿瘤活性的化合物，具体涉及从中药京大戟中提取的得到的具有抗肿瘤活性的三环二萜类化合物新化合物，属于医药技术领域。

背景技术

京大戟(Euphorbia pekinensis Radix)为大戟科多年生草本植物大戟(Euphorbia pekinensis Rupr.)的干燥根，具有泻水逐饮，消肿散结之功效。主要用于水肿胀满，胸腹积水，痰饮积聚，气逆咳喘，二便不利，痈肿疮毒，瘰疬痰核。研究表明，京大戟主要生物活性成分为二萜类成分，另外该属植物中还含有三萜、黄酮、鞣质和酸类化合物等成分。本发明对京大戟中的有效成分深入研究，分离纯化得到新的具有抗肿瘤活性的二萜类成分。

恶性肿瘤疾病一直威胁人民生命健康，每年病死率和发病率较高，现已有多种抗肿瘤药物应用，但是存在毒副作用大，成本高的缺点。

发明内容

发明目的：本发明的目的是对京大戟中的有效成分进行深入研究，分离纯化得到新的具有抗肿瘤活性的三环二萜类成分。本发明另外一个目的是提供三环二萜类成分的制备方法，并通过实验筛选出具有抗肿瘤活性的化合物。

技术方案：为了实现以上目的，本发明采取的技术方案为：

具有抗肿瘤活性的三环二萜类化合物，其特征在于，其结构式如下：

本发明提供的具有抗肿瘤活性的三环二萜类化合物的制备方法，包括如下步骤：

(1)提取：

取京大戟药材，加入乙醇回流提取，得到乙醇提取液；

(2)萃取：

将步骤(1)京大戟乙醇提取液浓缩至无醇味，用水混悬，加入等体积乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯层，减压浓缩，得浸膏；

(3)分离

取浸膏经中压硅胶柱色谱分离，石油醚-乙酸乙酯体系梯度洗脱，得到馏分JDJ-HeN-EA-1～14；

取馏分JDJ-HeN-EA-9经Sephadex LH-20分离，二氯甲烷-甲醇体系洗脱，得到馏分JDJ-HeN-EA-9S6，将该馏分经Pre-HPLC和Semi-pre-HPLC纯化，得到化合物Ⅰ；

取馏分JDJ-HeN-EA-10经Sephadex LH-20分离，二氯甲烷-甲醇体系洗脱，得到馏分JDJ-HeN-EA-10S5和JDJ-HeN-EA-10S9；

将JDJ-HeN-EA-10S9馏分经Semi-pre-HPLC和SFC手性分离，得到化合物Ⅱ。

作为优选方案，以上所述的具有抗肿瘤活性的三环二萜类化合物的制备方法，包括如下步骤：

(1)提取：

取京大戟药材，加入4～16倍量体积浓度80～95％乙醇回流提取1～3次，每次1～2h，得乙醇提取液。

(2)萃取

将步骤(1)乙醇提取液浓缩至无醇味，加水混悬，加入等体积乙酸乙酯萃取2～4次，合并乙酸乙酯层，减压浓缩，得浸膏；

(3)分离

取步骤(2)浸膏，经中压硅胶柱色谱分离，用体积比100:0-0:100的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，得到馏分JDJ-HeN-EA-1～14；