[发明专利]一种人诱导多能干细胞及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种人诱导多能干细胞株SXMUi002‑A‑1，所述人诱导多能干细胞株SXMUi002‑A‑1保藏于国家典型培养物保藏中心，保藏编号为CGMCC No：22359。该iPSC通过从携带F9c.223C＞T(p.R75X)无义突变的B型血友病患者尿液中提取尿液细胞重编程得到，经进一步研究发现，其不仅在细胞形态、基因表达、增殖及分化潜能方面类似于胚胎干细胞，并且具有向三个胚层分化的潜能。本发明制备得到的人诱导多能干细胞株SXMUi002‑A‑1对血友病无义突变的分子机制研究，血友病的检测、药物筛选、基因治疗等临床应用研究具有重要价值，提供了重要资源。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种人诱导多能干细胞及其制备方法和应用。

背景技术

血友病是一种X染色体连锁隐性遗传性出血性疾病，共同的特征是活性凝血活酶生成障碍，凝血时间延长，终身具有轻微创伤后出血倾向，重症患者没有明显外伤也可发生“自发性”出血。F8基因缺陷导致血友病A(hemophiliaA，HA)，F9基因缺陷导致血友病B(hemophiliaB，HB)，在男性人群中，发病率分别为1/5,000及1/25,000[杨仁池.血友病诊断与治疗中国专家共识(2017年版)[J].中华血液学杂志,2017,38(05):364-370.]。FactorIX Gene(F9)Variant Database(http://www.factorix.org/)显示3713个个案报告中有1094种F9变体，其中无义突变有87种，约占8％。

血友病现有的治疗手段仍以凝血因子制品输注的替代治疗为主，对家庭和社会造成极大负担[Chinese MAH T,ThrombosisAnd Hemostasis Group C S O H.Chineseguidelines on the treatment of hemophilia(version 2020)[J].Zhōnghuá xuèyèxuézázhì,2020,41(4):265-271.]。此外，长期输注凝血因子导致抑制物的产生使得替代治疗疗效降低甚至无效，研究显示无义突变是凝血因子抑制物产生的高危因素[Gouw S C,vanden Berg H M,Oldenburg J,et al.F8 gene mutation type and inhibitordevelopment in patients with severe hemophilia A:systematic review and meta-analysis[J].Blood,2012,119(12):2922-2934.]。