[发明专利]一种GA-T细胞及其制备方法以及在白血病和抗GVHD中的应用有效
申请号: | 202111025332.1 | 申请日: | 2021-09-02 |
公开(公告)号: | CN113584012B | 公开(公告)日: | 2023-04-11 |
发明(设计)人: | 张玲玲;梅旦;薛子扬;张贤政;于倩倩 | 申请(专利权)人: | 安徽医科大学 |
主分类号: | C12N11/10 | 分类号: | C12N11/10;C12N11/02;A61K35/17;A61P35/02;A61P37/06 |
代理公司: | 北京知文通达知识产权代理事务所(普通合伙) 16051 | 代理人: | 欧阳石文 |
地址: | 230000 *** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 ga 细胞 及其 制备 方法 以及 白血病 gvhd 中的 应用 | ||
1.一种GA-T细胞的制备方法,包括以下步骤:
①T细胞悬液处理形成单细胞悬液;
②加入明胶溶液,置于恒温摇床培养箱摇晃混匀;所述明胶为由羧基化学转换为氨基的改性明胶,且为A型明胶;以1mL计,1×106个的单细胞悬液中,明胶溶液中明胶浓度为0.1%-0.3%(w/v);
③孵育,使明胶吸附在T细胞表面,形成第一层明胶包被;
④加入藻酸盐溶液,明胶与藻酸盐通过静电沉积作用紧密结合,形成第一层藻酸盐包被;以1mL计,1×106个的单细胞悬液中,藻酸盐溶液中藻酸盐浓度为0.2-0.3%(w/v);
⑤重复步骤②-④,重复次数为n,其中n=2。
2.根据权利要求1所述的GA-T细胞的制备方法,其特征在于,所述②中,以1mL计,1×106个的单细胞悬液中,明胶溶液中明胶浓度为0.2%(w/v);所述④中,以1mL计,1×106个的单细胞悬液中,藻酸盐溶液中藻酸盐的浓度为0.25%。
3.根据权利要求1所述的GA-T细胞的制备方法,其特征在于,所述②中,置于恒温摇床培养箱以200rpm摇晃混匀3min。
4.根据权利要求3所述的GA-T细胞的制备方法,特征在于,所述③中,孵育时间为5-30min,期间每隔2min轻微振荡一次。
5.根据权利要求1至4任一项所述的GA-T细胞的制备方法,特征在于,所述T细胞为经无菌分离、磁珠分选及体外扩增的T细胞。
6.如权利要求1至5任一所述的GA-T细胞的制备方法得到的GA-T细胞在制备白血病和/或抗GVHD的药物中的应用。
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