[发明专利]一种靶向Aβ42纤维体的类肽及其制备方法与应用

说明书

本发明涉及生物医学技术领域，具体公开了一种靶向Aβ42纤维体的类肽及其制备方法与应用。本发明的类肽包括：第一亚单元：半胱氨酸、第二亚单元：1,4‑丁二胺、第三亚单元：异丁胺、第四亚单元：乙醇胺、第五亚单元：糠胺、第六亚单元：异丁胺和第七亚单元：1,4‑丁二胺。本发明的类肽可以结合表面等离激元共振成像技术检测阿尔兹海默病或遗忘型轻度认知障碍，具有特异性高、灵敏度强的优点。此外，本发明可无创直接检测血液中的Aβ42纤维体含量，可通过识别血清中的AD标志物淀粉样蛋白进而对AD患者和正常人进行有效地区分，为诊断和监控阿尔茨海默症或遗忘型轻度认知障碍疾病进展和药物研发提供了新的液体活检方法与思路。

技术领域

本发明涉及生物医学技术领域，具体地说，涉及一种靶向Aβ42纤维体的类肽及其制备方法与应用。

背景技术

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是最常见的与年龄相关的神经退行性疾病之一，其临床表现包括进行性记忆障碍、认知功能障碍和语言障碍。目前，60岁以上人口中阿尔兹海默病患者占据1％，且发病率每五年翻一番，人数众多，这对患者和社会都带来了巨大的挑战。AD作为一种老年人的常见病、多发病和高负担疾病，已经成为全球科学家们最关注的领域之一。

不同淀粉样蛋白疾病发生病变的部位有所不同，主要涉及神经系统、心脏、肝脏、肾脏等。某些蛋白质单体本身无毒性或毒性很小，但它们可聚集成具有毒性作用的寡聚物(oligomer)或纤维状物(fibril)而引起一系列疾病，如β-amyloid(Aβ)可引起AD，α-synuclein可引起PD。阿尔茨海默氏病的发病机制尚不清楚，但最被广泛接受的假设涉及到β-淀粉样蛋白(Aβ)级联。根据这一假设，Aβ在大脑中的积累是导致阿尔茨海默氏症诱导和加重的主要原因。当Aβ聚集形成大脑沉积物时，它会导致神经退行性疾病，导致临床观察到的患者记忆和认知能力的丧失。Aβ是一种两亲性的分子，具有自组装和积聚的特性，该特性将会触发复杂的淀粉样级联病理反应并最终导致神经元的功能紊乱。Aβ在体内和体外都会自发地聚集成多种并存的物理类型。一种是寡聚体，由2-6个肽构成，寡聚体共价形成中间组合体，寡聚化是自然界中广泛存在的进化规律之一，寡聚化可以提高蛋白质的稳定性，增加局部蛋白浓度，赋予组装体变构协同性，并在分子识别过程中提供了高特异性；另一种是纤维体，高度可溶性的蛋白质逐渐转化为不溶性的丝状聚合物，其中含有特征的交叉β折叠的片状结构。这些丝状结构作为淀粉样纤维积累，随后沉积在受影响的脑细胞的细胞核或细胞质中或细胞外空间。Aβ的神经毒性已被归因于其原纤维形式。Aβ是通过β-和δ-分泌酶连续切割淀粉样前体跨膜蛋白(APP)形成的，其中最具病理生理学相关性的亚型是Aβ40和Aβ42。且已有的研究证实，Aβ42具有更强的毒性，且更容易聚集，从而形成Aβ沉淀的核心，引发神经毒性作用。Aβ42可以穿过血脑屏障，进入血液，因此可以通过监测血液中的Aβ42，实现对阿尔兹海默症的早期诊断。对于遗忘型轻度认知障碍也可通过Aβ42进行检测。

类肽，也称聚合N-取代-甘氨酸，是一类拟肽化合物，其侧链连接Nα而不是Cα上。类肽相比于多肽，具有以下几种优点：(1)较高的亲和性和选择性，类肽可以保持某种能够产生所期望性质的构象，可消除或避免不希望的性质；(2)高吸收性和代谢稳定性；(3)避免免疫原性；(4)既可制成受体激动剂，也可制成抑制剂或拮抗剂。由于类肽化合物具有良好的生物活性和药理性质，它能够有效地抑制活体实验中的恶化情况并且具有良好的细胞膜穿透性。类肽较好的药理性被越来越多研究人员所关注。

阿尔兹海默症的可怕在于无法及时发现和预防，缺乏有效的普查手段，血液检测淀粉样蛋白浓度普查方法的出现，可以大大增强阿尔兹海默症的检出率。然而，脑脊液(CSF)和PET成像检查费用高、伤害大，很难在大众群体中被普及。目前，只能在临床症状较为明显时对阿尔兹海默症作出诊断，缺乏有效的早期检查方法和生化方面的检查手段。因此，寻找血液的检测方法和生物标记物成为研究焦点。高特异性的血液生物标记物可用于AD病理的检测，对于一线临床应用、促进临床试验招募和监测等方面都意义非凡。