[发明专利]一种电渗析制备1,4-丁二磺酸腺苷蛋氨酸盐的方法

权利要求书

1.一种电渗析制备1,4-丁二磺酸腺苷蛋氨酸盐的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

采用发酵法获得腺苷蛋氨酸的酵母发酵液，所述的发酵法包括以下步骤：①将腺苷蛋氨酸产生菌接种于斜面培养基进行斜面培养；②将生长好的斜面接种于种子培养基进行种子培养；③将种子液接种至基础培养基进行好氧发酵；④当培养液糖浓度降至≤0.05g/L时，流加补糖培养基，调节发酵罐参数，使DO≥30%，补糖培养基补加流速为8～12g糖/h/L基础培养基；⑤当发酵液的生物量至0.15g/mL～0.2g/mL（湿菌体/发酵液）时，补加流速为，补加流速为0.8～1.5g蛋氨酸/h/L基础培养基；⑥发酵至48～72h时，获得腺苷蛋氨酸的酵母发酵液，下罐；

获得菌体：下罐后的酵母发酵液，用陶瓷膜设备，去除大部分发酵残留培养基，至湿菌体浓度至50%～60%，获得菌液；

清洗菌体：在陶瓷膜设备中，将上述菌液，加纯化水清洗，至菌体浓度至50%～60%，出水电导率＜1500μs/min；

破碎菌体：采用快速升温降温法，将清洗后的菌体快速升温至70～80℃，保温15～30min后，快速降温至室温；

获得腺苷蛋氨酸粗液：将上述菌体破碎液，过陶瓷膜设备，并加纯化水清洗至出水电导率＜3000μs/min，收集得到透出液；

超滤除杂：将透出液通过截留分子量为5～10KD的聚醚砜材质的有机膜，收集得到滤出液；

纳滤浓缩、除无机盐：将滤出液通过截留分子量为200～400D的聚酰胺材质的有机膜，收集腺苷蛋氨酸浓度在5～10g/L的截留液，获得腺苷蛋氨酸的浓缩液；

电渗析成盐：向腺苷蛋氨酸的浓缩液中加入1,4-丁二磺酸钠，在电渗析装置中采用两室双极膜置换，收集物料回流液，得到1,4-丁二磺酸腺苷蛋氨酸盐粗品。

2.脱色提纯：将1,4-丁二磺酸腺苷蛋氨酸盐粗品流过大孔吸附树脂，获得溶液中腺苷蛋氨酸HPLC的检测结果≥98%的1,4-丁二磺酸腺苷蛋氨酸盐；

干燥：将高纯度的1,4-丁二磺酸腺苷蛋氨酸盐通过真空冷冻干燥或喷雾干燥，获得1,4-丁二磺酸腺苷蛋氨酸盐的干燥品。

3.根据权利要求1所述的一种电渗析制备1,4-丁二磺酸腺苷蛋氨酸盐的方法，其特征在于，所述步骤（1）中的腺苷蛋氨酸产生菌为面包酵母菌种。

4.根据权利要求1所述的一种电渗析制备1,4-丁二磺酸腺苷蛋氨酸盐的方法，其特征在于，所述步骤（1）中的斜面培养基含有：酵母粉1%、牛肉蛋白胨2%、葡萄糖2%、琼脂2%，斜面培养基的培养温度为25℃～35℃，培养时间24～48h。

5.根据权利要求1所述的一种电渗析制备1,4-丁二磺酸腺苷蛋氨酸盐的方法，其特征在于，所述步骤（1）中的种子培养基含有：酵母粉1%、牛肉蛋白胨2%、葡萄糖2%，种子培养基的培养温度为25℃～35℃，培养时间12-24h。

6.根据权利要求1所述的一种电渗析制备1,4-丁二磺酸腺苷蛋氨酸盐的方法，其特征在于，所述步骤（1）中的发酵基础培养基含有：硫酸铵、七水硫酸镁、七水硫酸锌、葡萄糖、磷酸二氢钾，发酵基础培养基的培养温度为25℃～35℃，pH为4～6；所述步骤（1）中的补糖培养基含有：七水硫酸镁、硫酸钾、硫酸钠、葡萄糖、磷酸二氢钾；所述步骤（1）中的诱导培养基含有：七水硫酸镁、硫酸钾、硫酸钠、葡萄糖、磷酸二氢钾、蛋氨酸。

7.根据权利要求1所述的一种电渗析制备1,4-丁二磺酸腺苷蛋氨酸盐的方法，其特征在于，所述步骤（2）、步骤（3）和步骤（5）中的陶瓷膜孔径均为20～200nm。

8.根据权利要求1所述的一种电渗析制备1,4-丁二磺酸腺苷蛋氨酸盐的方法，其特征在于，所述步骤（8）中腺苷蛋氨酸的浓缩液中加入1,4-丁二磺酸钠，使1,4-丁二磺酸与腺苷蛋氨酸的摩尔比为1.6～1.7。