[发明专利]高螯合活性的小分子肽螯合亚铁及制备方法和补铁剂应用

说明书

本发明公开了六种高螯合活性的小分子肽螯合亚铁及制备方法和其在补铁剂中的应用，属于食品营养及医药领域，由小分子肽与亚铁盐螯合而成，所述小分子肽包括按以下氨基酸序列组成的小分子肽中的一种或多种，分别为：Ala‑Glu‑Asn‑Asn‑Gln‑Arg‑Asn‑Phe、Ile‑Thr‑Pro‑Glu‑Lys‑Asn‑Pro‑Gln、Glu‑Asn‑Leu‑Ala‑Arg‑Pro、Ala‑Glu‑Phe‑Ala‑Glu‑Val‑Ser‑Lys、Asn‑Asp‑Asn‑Leu‑Met‑Lys、Gln‑Asp‑Thr‑Pro‑Arg‑Val。所述小分子肽螯合亚铁可以作为一种补铁剂，具有螯合率高，消化率高，稳定性好等特点。

技术领域

本发明属于食品营养及医药领域，涉及高螯合活性的小分子肽螯合亚铁及制备方法和补铁剂应用。

背景技术

在全球范围内，铁缺乏被认为是三种隐性饥饿(微量营养素缺乏)之首。全世界约20％的人患有缺铁性贫血，其中孕妇和老年人所占比例较大，而成年男性的患病率也有10％。严重的铁缺乏状况促使各类补铁剂应用于食品、医药工业。目前，继第一代硫酸亚铁等无机补铁剂、第二代乳酸亚铁等有机补铁剂之后，肽金属离子螯合物作为第三代补铁剂，在膳食补充剂及医药中的应用正成为一个新的热点。

有研究表明，低分子肽具有抗氧化性、提高机体免疫能力、降血压、抗糖尿病活性、对癌细胞具有一定抑制及预防作用等。Chen等研究发现低分子量肽(LWMP)处理有助于再生弹性纤维和胶原网络，增加大鼠血清中的超氧化物歧化酶(SOD)并显着降低脂质过氧化物(MDA)；Eckert等从丝瓜蛋白酶水解的蛋黄蛋白中提取的丝瓜蛋白酶种子可以分离出肽SWV，SWVE和DILN，显示出ACE的IC 50抑制值分别为36.2、33.88和73.44μg/mL。DPP-IV酶负责使肠降血糖素激素葡萄糖依赖性促胰岛素多肽和GLP-1失活，因此其抑制作用对控制高血糖症和2型糖尿病很重要；García等研究了一富含海参水解物的食品，并报告了在小鼠肠组织中测试的抗炎、抗氧化和血管紧张素转化酶抑制活性以及高生物利用度。这项研究中还提到的其他研究显示出低分子量肽具有抗衰老和防癌作用。

肽金属螯合物具有较高的生物利用度，而且具有吸收快、营养性强等优势。同时，肽金属螯合物具有一些其他营养元素补充剂没有的生物活性，如抗氧化，抗菌，免疫调节等。已知的研究发现，小分子肽的吸收机制具有这些特点：小分子肽吸收快速，耗能低且载体不易饱和，而且哺乳动物对肽中氨基酸残基的吸收速度大于对游离氨基酸的吸收速度，所以小分子肽金属螯合物更适合用作营养元素的补充剂。由于绿豆的大分子蛋白质不易消化，且含有抗营养因子，直接食用其营养吸收及活性功能较低。因此，有必要对绿豆蛋白进行水解，获得小肽，不仅能提高其生物利用度，还能产生新的活性功效。

现阶段，对金属螯合活性肽的分离纯化技术仍面临产物纯度不高、螯合活性相对较低等问题，而固定化金属螯合亲和层析是分离具有金属螯合活性肽的最重要的一种纯化方法。林等采用金属亲和色谱从罗非鱼皮中获得TSCIP肽段，王等通过固定化金属亲和层析(IMAC-Zn²⁺)从芝麻水解物中鉴定出六种锌螯合肽，崔等采用固定金属亲和度色谱(IMAC)从南极磷虾中分离肽段，研究其结构特征，由此可实现高螯合活性肽的纯化。

本发明以固定化金属螯合亲和层析方法从绿豆肽中分离纯化出高螯合活性的小分子肽，并与亚铁盐进行高效螯合，同时加入保护剂，防止Fe²⁺氧化成Fe³⁺从而失去补铁功效，不仅可以制备出新型铁补充剂，还可以为绿豆营养功能的开发与深度利用提供新的途径。

发明内容

本发明提供了六种高螯合活性的小分子肽螯合亚铁，由小分子肽与亚铁盐螯合而成，所述小分子肽包括按以下氨基酸序列组成的小分子肽中的一种或多种，分别为：

(1)Ala-Glu-Asn-Asn-Gln-Arg-Asn-Phe；

(2)Ile-Thr-Pro-Glu-Lys-Asn-Pro-Gln；