[发明专利]一种基于免疫组化生成训练数据的方法和存储设备有效
申请号: | 202111041413.0 | 申请日: | 2021-09-07 |
公开(公告)号: | CN113762379B | 公开(公告)日: | 2022-06-07 |
发明(设计)人: | 杨清海;程本亮;陈惠玲;王小亚;吴楠楠;周洪辉 | 申请(专利权)人: | 福州迈新生物技术开发有限公司 |
主分类号: | G06K9/62 | 分类号: | G06K9/62;G16B40/00 |
代理公司: | 福州市景弘专利代理事务所(普通合伙) 35219 | 代理人: | 魏小霞;林祥翔 |
地址: | 350108 福建省福州市闽侯县科技*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 免疫 化生 训练 数据 方法 存储 设备 | ||
1.一种基于免疫组化生成训练数据的方法,其特征在于,包括步骤:
通过不同抗体对目标对象进行免疫组化染色;
根据染色结果对所述目标对象进行标注;
根据标注结果生成训练数据;
所述“通过不同抗体对目标对象进行免疫组化染色”,具体还包括步骤:
对处理后的胃癌组织待染色切片,常规二甲苯脱蜡3次,每次6分钟,100%、100%、95%、85%梯度乙醇中水化,每次3分钟,最后自来水冲洗,进行抗原修复,切片放入湿盒中,PBS冲洗3×3分钟,滴加3%H2O2孵育10分钟,PBS冲洗3×3分钟;
甩干切片,滴加CD8抗体试剂,室温孵育1小时,PBS冲洗3×3分钟,滴加二抗室温孵育15-30分钟,PBS冲洗3×3分钟,甩去PBS,用新鲜配置的AP-Red显色液显色5-15分钟,苏木素复染25秒,PBS返蓝30秒,水性封片剂封片;
抗体定位于肿瘤细胞膜上,并呈红色染色,获取CD8抗体染色后的组织切片的数字病理图像;
将所述染色后的组织切片浸泡于二甲苯中,将封片剂洗掉后,将切片浸泡于95%酒精中,将红色染色洗去;
甩干红色染色洗去后的组织切片,进行抗原修复,滴加PD-L1,室温孵育1小时,PBS冲洗3×3分钟,滴加二抗室温孵育15-30分钟,PBS冲洗3×3分钟,甩去PBS,用新鲜配置的DAB显色液显色3-10分钟,苏木素复染25秒,PBS返蓝30秒,按照85%-95%-100%-100%的酒精梯度依次脱水3分钟,最后二甲苯透明3分钟,中性树胶封片;
PD-L1抗体定位于肿瘤细胞细胞膜和免疫细胞的细胞膜、细胞质上,并呈棕黄色染色,细胞核经苏木素复染后呈蓝色,获取PD-L1抗体染色后的组织切片的数字病理图像;
所述“根据染色结果对所述目标对象进行标注”,具体还包括步骤:
将CD8抗体染色后的组织切片的数字病理图像与PD-L1抗体染色后的组织切片的数字病理图像进行重叠比对,将CD8和PD-L1均为阳性的细胞在PD-L1抗体染色后的病理图像中标注出来。
2.一种存储设备,其中存储有指令集,其特征在于,所述指令集用于执行:获取不同抗体对目标对象进行免疫组化染色后的数字病理图像;
在所述数字病理图像上对所述目标对象进行标注;
根据标注结果生成训练数据;所述数字病理图像通过如下方式获取:
对处理后的胃癌组织待染色切片,常规二甲苯脱蜡3次,每次6分钟,100%、100%、95%、85%梯度乙醇中水化,每次3分钟,最后自来水冲洗,进行抗原修复,切片放入湿盒中,PBS冲洗3×3分钟,滴加3%H2O2孵育10分钟,PBS冲洗3×3分钟;
甩干切片,滴加CD8抗体试剂,室温孵育1小时,PBS冲洗3×3分钟,滴加二抗室温孵育15-30分钟,PBS冲洗3×3分钟,甩去PBS,用新鲜配置的AP-Red显色液显色5-15分钟,苏木素复染25秒,PBS返蓝30秒,水性封片剂封片;
抗体定位于肿瘤细胞膜上,并呈红色染色,获取CD8抗体染色后的组织切片的数字病理图像;
将所述染色后的组织切片浸泡于二甲苯中,将封片剂洗掉后,将切片浸泡于95%酒精中,将红色染色洗去;
甩干红色染色洗去后的组织切片,进行抗原修复,滴加PD-L1,室温孵育1小时,PBS冲洗3×3分钟,滴加二抗室温孵育15-30分钟,PBS冲洗3×3分钟,甩去PBS,用新鲜配置的DAB显色液显色3-10分钟,苏木素复染25秒,PBS返蓝30秒,按照85%-95%-100%-100%的酒精梯度依次脱水3分钟,最后二甲苯透明3分钟,中性树胶封片;
PD-L1抗体定位于肿瘤细胞细胞膜和免疫细胞的细胞膜、细胞质上,并呈棕黄色染色,细胞核经苏木素复染后呈蓝色,获取PD-L1抗体染色后的组织切片的数字病理图像;
所述“在所述数字病理图像上对所述目标对象进行标注”,具体还包括步骤:
将CD8抗体染色后的组织切片的数字病理图像与PD-L1抗体染色后的组织切片的数字病理图像进行重叠比对,将CD8和PD-L1均为阳性的细胞在PD-L1抗体染色后的病理图像中标注出来。
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