[发明专利]黄曲霉预警分子参考物质、制备方法及其应用

权利要求书

1.黄曲霉预警分子参考物质，其特征在于：其由黄曲霉产毒菌制备获得，含有黄曲霉毒素预警分子AFT-YJFZP008，黄曲霉毒素预警分子AFT-YJFZP008的氨基酸序列如SEQ IDNO.1 所示，黄曲霉预警分子参考物质通过检测标定其中预警分子AFT-YJFZP008的含量，作为参考物质使用。

2.权利要求1所述的黄曲霉预警分子参考物质的制备方法，其特征在于：包括：将含有黄曲霉毒素预警分子的黄曲霉产毒菌接种到察氏培养基中培养，收集长成的菌丝，用液氮研磨菌丝至粉末状，再将菌丝粉末置于水或常规缓冲液中，随后用高压均质仪裂解菌丝粉末，获得黄曲霉产毒菌裂解液，裂解液经过脱盐处理,并通过检测标定其中预警分子AFT-YJFZP008的含量，得到黄曲霉预警分子参考物质。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：还包括将脱盐后裂解液，再通过常规的冷冻干燥去除水分，获得黄曲霉产毒菌裂解液干物质，通过检测标定黄曲霉产毒菌裂解液干物质中预警分子AFT-YJFZP008的含量。

4.一种样品中黄曲霉预警分子参考物质含量或黄曲霉毒素预警分子AFT-YJFZP008含量的检测方法，其特征在于：以权利要求1所述的黄曲霉预警分子参考物质建立标准曲线，测定样品中黄曲霉预警分子参考物质含量，以及进一步地，结合黄曲霉预警分子参考物质中AFT-YJFZP008的黄曲霉毒素预警分子标定含量，用于黄曲霉毒素预警分子AFT-YJFZP008含量的检测，所述的黄曲霉毒素预警分子是指AFT-YJFZP008肽，其氨基酸序列如SEQ IDNO.1 所示。

5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于：标定黄曲霉预警分子参考物质中黄曲霉毒素预警分子AFT-YJFZP008含量为通过黄曲霉毒素预警分子AFT-YJFZP008检测方法标定黄曲霉产毒菌裂解液或者黄曲霉产毒菌裂解液干物质中AFT-YJFZP008含量，具体的过程为：

a制备黄曲霉预警分子参考物质溶液，加入到孔底包被有黄曲霉毒素预警分子AFT-YJFZP008的纳米抗体或单克隆抗体的酶标板孔中，反应，洗板；

b加入黄曲霉毒素预警分子AFT-YJFZP008多克隆抗体反应，洗板；

c加入与黄曲霉毒素预警分子AFT-YJFZP008多克隆抗体发生结合反应的辣根过氧化物酶标记抗体，反应，洗板；

d加入显色液反应；加入终止液，酶标仪读取并计算待测样品中AFT-YJFZP008的浓度；

用系列浓度的起标准物质作用的黄曲霉毒素产毒菌产毒力预警分子AFT-YJFZP008纯品溶液，替换待测液，用于制作标准曲线，得到黄曲霉预警分子参考物质中AFT-YJFZP008的浓度，标定黄曲霉预警分子参考物质中黄曲霉毒素预警分子AFT-YJFZP008含量。