[发明专利]黄曲霉预警分子参考物质、制备方法及其应用

说明书

本发明公开了黄曲霉预警分子参考物质、制备方法及其应用。其由黄曲霉产毒菌制备获得，含有黄曲霉毒素预警分子AFT‑YJFZP008，黄曲霉毒素预警分子AFT‑YJFZP008的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，黄曲霉预警分子参考物质通过检测标定其中AFT‑YJFZP008的含量，作为参考物质使用。可用于鉴别比较农田土壤、农产品及饲料等产品的黄曲霉毒素污染风险水平；稳定性好，货架期长，易操作，实用性强，容易推广应用。

技术领域

本发明涉及黄曲霉预警分子参考物质、制备方法及其应用。

背景技术

黄曲霉毒素毒性强、危害大，是污染食品种类最多的污染物，近年总体呈现污染加重趋势，严重威胁食品安全和人民健康。黄曲霉毒素是自然界毒性最强的一类真菌毒素，其中黄曲霉毒素B1是国际癌症研究组织(International Agency for Research on Cancer,IARC)认定的I类致癌物，已引发过多起人畜群体中毒事件，成为肝癌病例高发的主要原因之一。根据近5年Web of Science检索数据统计：黄曲霉毒素污染食品及原料种类超过了110种，高居污染物首位。

对黄曲霉毒素污染产品实施预警是国际通行做法。现有黄曲霉毒素预警方法主要是基于黄曲霉毒素检测技术建立，用于毒素污染水平评价或产后污染程度与消费风险评估，一旦检测发现，污染往往已经发生，难以满足事前预警与指导防控的迫切要求。欧盟食品和饲料快速预警系统(Rapid Alert System for Food and Feed，RASFF)利用限量标准与检测获得食品与饲料中黄曲霉毒素含量，对各国输入欧盟的食品与饲料进行快速预警。美国研究机构基于黄曲霉毒素检测技术与污染监测数据，研究建立了多元罗吉斯蒂回归分析和叠加高斯处理等预警模型，主要用于评估产后玉米等农产品真菌毒素污染程度与消费风险。

已有研究表明，黄曲霉毒素的产毒真菌不同菌株之间产毒力差异很大，从不产毒真菌菌株一直到高产毒力菌株都有分布。以花生中分离的黄曲霉菌株为例，有相当一部分黄曲霉菌株缺失了产毒基因或产毒关键调控基因，它们不具有产生黄曲霉毒素的能力；有约不到20％的黄曲霉菌株为强产毒力菌株。如何在黄曲霉毒素污染事前评估预警风险？这一直是本领域的世界性难题。

综合国内外近二十年研究进展，当前黄曲霉毒素早期预警分子不明是根本原因。针对这一瓶颈难题，发明人团队经过十多年攻关研究，构建了我国黄曲霉毒素产毒菌株库、菌株产毒力数据库、强产毒菌株蛋白质抗体库，建立了用于发掘黄曲霉菌株产毒力指示分子的抗体库方法，发现了黄曲霉毒素的产毒真菌产毒力指示分子，并首次明确其具有黄曲霉毒素污染事前预警功能，因此成为黄曲霉毒素预警分子。研究发现该预警分子发生水平与黄曲霉毒素污染水平之间存在显著的正相关关联性，由此利用此关联性，进一步建立了黄曲霉毒素分子预警方法。然而，在实际应用中我们发现黄曲霉毒素预警分子纯品用作标准物质时存在稳定性较差容易引发检测结果偏离的问题。进一步，我们为了通过准确检测黄曲霉毒素预警分子以实现其预警功能，本发明提供了含有黄曲霉毒素预警分子的黄曲霉预警分子参考物质黄曲霉预警分子参考物质及其制备方法，并建立了参考物质的标准曲线，用于黄曲霉毒素污染风险预测预警，攻克了上述难题。

发明内容

本发明针对现有技术存在的不足，提供黄曲霉预警分子参考物质、制备方法及其应用，其用于预测预警黄曲霉毒素风险水平，容易推广应用。

为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案为：

黄曲霉预警分子参考物质，其由黄曲霉产毒菌制备获得，含有黄曲霉毒素预警分子，黄曲霉毒素预警分子AFT-YJFZP008的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，黄曲霉预警分子黄曲霉预警分子参考物质通过检测标定其中AFT-YJFZP008的含量，作为参考物质使用。