[发明专利]一种对MDA单细胞全基因组扩增产物的质控方法

权利要求书

1.一种对MDA单细胞全基因组扩增产物的质控方法，其特征在于：包含8对引物，分别扩增8个管家基因的相应DNA片段，包括如下步骤：

1)所用的8对引物序列合成后，采用PAG法纯化并冻干成粉末状保存、运输；

2)将8对引物分别用ddH₂O稀释成100μmol/L的母液，再各取20μl上下游引物母液混合在一起并调整浓度至10μmol/L，制备成引物工作液；

3)吸取2μl WGA产物和2μl引物工作液，采用HiFi酶或者其它高效、高保真聚合酶进行PCR反应；

4)PCR反应结束后，取10μl产物并加入2μl 6×DNA loading buffer混匀后，在2％琼脂糖凝胶上电泳，120V，35min，然后在凝胶成像仪上紫外光成像；如果模板DNA质量较好，理论上可以扩增出8条产物；如果只有6个及以上扩增产物，则说明该模板DNA可用于下游基因芯片检测，且条带越多、越清晰明亮，表明模板DNA的质量越好，基因芯片的检测结果越理想；

所用的8对引物序列和扩增产物的片段长度如下所示：

2.根据权利要求1所述的一种对MDA单细胞全基因组扩增产物的质控方法，其特征在于：步骤3)所述的高效聚合酶，选自HiFi高保真酶。

3.根据权利要求1所述的一种对MDA单细胞全基因组扩增产物的质控方法，其特征在于：步骤3)所述的进行PCR反应，反应体系和热循环条件如下：

10×HiFi Buffer I 2.5μl+dNTP 2μl+2μl混合引物+0.5μl HiFi Polymerase+DNA溶液或WGA产物3μl+ddH₂O 15μl，混均，总反应体积为25μl；94℃变性3min，94℃ 30s→61℃40s→72℃ 1min，循环35次，72℃延伸3min。