[发明专利]一种早产预测标志物的羊水蛋白质组学检测方法及应用

权利要求书

1.一种早产预测标志物的羊水蛋白质组学检测方法，其特征在于，所述早产预测标志物的羊水蛋白质组学检测方法包括：

步骤一，通过液相色谱-质谱联用的方法获得羊水差异表达蛋白；

步骤二，差异蛋白的GO功能表征及KEGG通路分析；

步骤三，应用酶联免疫吸附试验对选定的候选蛋白进行验证。

2.根据权利要求1所述的早产预测标志物的羊水蛋白质组学检测方法，其特征在于，所述步骤一具体包括：

对足月产正常对照组、足月组、早产组羊水通过液相色谱-质谱联用的方法进行蛋白组检测，确定四个重叠的部门集群内的羊水差异表达蛋白质DEPs。

3.根据权利要求1所述的早产预测标志物的羊水蛋白质组学检测方法，其特征在于，所述步骤二具体包括：

通过GO数据库从生物过程、细胞成分和分子功能对DEPs进行分类；

通过KEGG分析DEPs的生物学功能，包含9种信号通路，包括碳代谢、糖酵解/糖异生、氨基酸生物合成、补体和凝血级联、HIF-1信号通路、蛋白质消化和吸收、白细胞跨内皮迁移、肾素-血管紧张素系统、谷胱甘肽代谢；

分析与不明原因早产相关的DEPs的蛋白质相互作用网络，并基于44种蛋白质构建蛋白质-蛋白质相互作用网络，根据统计显著性、生物学机制及与不明原因早产相关的差异表达选择目标蛋白质。

4.根据权利要求1所述的早产预测标志物的羊水蛋白质组学检测方法，其特征在于，所述步骤三第二个独立队列的样品包括：20名34周前分娩的病例组羊水样本和20名足月分娩对照组羊水样本。

5.根据权利要求1所述的早产预测标志物的羊水蛋白质组学检测方法，其特征在于，所述早产预测标志物的羊水蛋白质组学检测方法具体包括：

步骤1，实验分组：足月产正常对照组、出现早产征兆经过宫颈环扎保胎到≥37周的足月组、出现早产征兆经过宫颈环扎＜34周分娩的早产组；

步骤2，羊水标本收集和处理；

步骤3，蛋白组学分析；

步骤4，筛选早产潜在预测标志物；

步骤5，利用筛选早产潜在预测标志物进行对照组、早产组识别；

步骤6，对选定的候选蛋白进行验证。

6.根据权利要求5所述的早产预测标志物的羊水蛋白质组学检测方法，其特征在于，所述步骤3蛋白组学分析包括：

样品预处理，羊水样品在4℃下以12000g离心10分钟，以去除杂质；

蛋白组学检测：进行胰酶酶解、TMT或iTRAQ标记、HPLC分级、液相色谱-质谱联用分析、数据库搜索、生物信息学分析以及蛋白功能富集分析。