[发明专利]293T多靶点靶细胞及其制备方法和应用在审
申请号: | 202111047915.4 | 申请日: | 2021-09-08 |
公开(公告)号: | CN115772499A | 公开(公告)日: | 2023-03-10 |
发明(设计)人: | 陈运凡;洪娟;沈俊杰;杨智;李欣 | 申请(专利权)人: | 重庆精准生物技术有限公司;重庆精准生物产业技术研究院有限公司 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N15/12;C12Q1/66;G01N33/68 |
代理公司: | 北京元本知识产权代理事务所(普通合伙) 11308 | 代理人: | 黎昌莉 |
地址: | 400000 重庆*** | 国省代码: | 重庆;50 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 293 多靶点 靶细胞 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种靶细胞,其特征在于,所述靶细胞包括表达抗原CEA的核苷酸片段a、表达抗原CD19的核苷酸片段b、表达抗原BCMA的核苷酸片段c、表达抗原CD70的核苷酸片段d。
2.根据权利要求1所述的靶细胞,其特征在于,所述靶细胞还包括表达标记蛋白的核苷酸片段。
3.根据权利要求1所述的靶细胞,所述核苷酸片段a和/或所述核苷酸片段b和/或所述核苷酸片段c和/或所述核苷酸片段d分别连在非/同一个表达载体上;连接于非同一个表达载体时,所述表达载体的类型相同或者不同。
4.权利要求1所述的靶细胞的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括:将所述核苷酸片段a、所述核苷酸片段b、所述核苷酸片段c、所述核苷酸片段d分别选择合适的感染系数转染到靶细胞a上;所述核苷酸片段a、核苷酸片段b、核苷酸片段c、核苷酸片段d的感染系数均为8-12MOI。
5.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,将所述核苷酸片段a、所述核苷酸片段b、所述核苷酸片段c、所述核苷酸片段d依次转染到所述靶细胞a。
6.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述制备方法还包括:使用标记蛋白的核苷酸序列转染到所述靶细胞a。
7.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述制备方法还包括:转染结束并进行培养后,使用对应的抗体标记所述靶细胞,然后分选出抗原CEA、抗原CD19、抗原BCMA和抗原CD70均表达阳性的细胞群。
8.根据权利要求4-7任一所述的制备方法,其特征在于,所述靶细胞a为293T细胞。
9.权利要求1-3任意一项所述的靶细胞在作为或制备细胞体外药效评价试剂或装置中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,所述细胞体外药效评价试剂或装置为检验CAR-T细胞杀伤效果试剂或装置和/或检验CAR-T细胞因子分泌量试剂或装置,所述CAR-T细胞靶向CEA、CD19、BCMA、CD70中至少一种。
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