[发明专利]一种新冠病毒检测用单抗

权利要求书

1.一种新冠病毒检测用单抗，其特征在于：所述新冠病毒检测用单抗的配方如下：以重量计：制备腹水，proteinG纯化的抗体1-3mg；制备腹水，抗原亲和纯化的抗体0.5-1.5mg；制备腹水，硫酸铵沉淀纯化抗体1-3mg；细胞上清扩大培养，proteinG纯化的抗体1-3mg；细胞上清扩大培养，抗原亲和纯化的抗体0.5-1.5mg。

2.根据权利要求1所述的一种新冠病毒检测用单抗，其特征在于：所述新冠病毒检测用单抗的配方如下：以重量计：制备腹水，proteinG纯化的抗体3mg；制备腹水，抗原亲和纯化的抗体1.5mg；制备腹水，硫酸铵沉淀纯化抗体3mg；细胞上清扩大培养，proteinG纯化的抗体3mg；细胞上清扩大培养，抗原亲和纯化的抗体1.5mg。

3.根据权利要求1所述的一种新冠病毒检测用单抗，其特征在于：所述新冠病毒检测用单抗的配方如下：以重量计：制备腹水，proteinG纯化的抗体2mg；制备腹水，抗原亲和纯化的抗体1mg；制备腹水，硫酸铵沉淀纯化抗体2mg；细胞上清扩大培养，proteinG纯化的抗体2mg；细胞上清扩大培养，抗原亲和纯化的抗体1mg。

4.根据权利要求1所述的一种新冠病毒检测用单抗，其特征在于：所述新冠病毒检测用单抗的配方如下：以重量计：制备腹水，proteinG纯化的抗体1mg；制备腹水，抗原亲和纯化的抗体0.5mg；制备腹水，硫酸铵沉淀纯化抗体1mg；细胞上清扩大培养，proteinG纯化的抗体1mg；细胞上清扩大培养，抗原亲和纯化的抗体0.5mg。

5.根据权利要求1至4任意一项所述的新冠病毒检测用单抗的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：

S1、订购小鼠；

S2、小鼠免疫程序：注射两次抗原，并采用ELISA方法检测小鼠血清效价；

S3、融合：培养细胞，第8天半量换液HT培养基，第10天后显微镜下画单克隆；

S4、融合检测：对免疫小鼠的血清做阳性对照，并使用酶标仪测定450nm/620nm处OD值；

S5、单克隆：选取20株阳性母细胞培养传代三次，选取OD值较大的细胞株制备抗体。

6.根据权利要求5所述的一种新冠病毒检测用单抗的制备方法，其特征在于：所述步骤S2中免疫程序方案包括以下步骤：

S201、抗原配制方法：按照每只小鼠免疫约20ug，将抗原与QuickAntibody-Mouse5W等体积混合；

S202、免疫前采集空白血清，小鼠通过剪脚指标记，抓住小鼠颈部皮肤将小鼠腹部朝上，剪右前趾为1号，左前趾为2号，右后趾为3号，左后趾为4号，5号为未剪脚趾，将小鼠固定于固定器内，用眼科剪在小鼠尾尖处剪断用EP管收取约20ul血用于分离血清，约3～5ul，手写标记，-20℃保存；

S203、初次免疫第0天：10-20ug蛋白抗原与QuickAntibody-Mouse5W等体积混合，充分混匀后在小鼠后腿部肌肉注射，在初次免疫前应采集空白血清；

S204、第二次免疫第21天：等同初次免疫；

S205、效价检测第35天：采用ELISA方法检测小鼠血清效价，采用断趾标记法标记小鼠，将小鼠固定于固定器内，用眼科剪在小鼠尾尖处剪断用EP管收取约20ul血并分离血清用于检测ELISA效价。