[发明专利]一种氰苷类化合物Menisdaurin F在制备抗乙肝病毒药物组合物中的应用

权利要求书

1.一种氰苷类化合物Menisdaurin F的分离纯化与鉴定方法，其特征在于：包括如下步骤：

1）将新鲜的木榄胚轴切片，用体积浓度95%工业酒精按照1:3的物料比提取，每次7天，连续提取3次，合并提取液后减压浓缩得到粗提物，然后采用高效液相色谱和高分辨质谱连用技术直接定位氰苷类化合物存在的极性范围为高极性部位，其中色谱柱：ACQUITY UPLCBEH AMIDE 1.7μm 2.1×100mm，A：超纯水，pH7.0，B:乙腈；梯度洗脱程序：0-4min，40%B；4-6min，45%B-85%B；6-14min，85%B；14-16min，100%B；18-20min，100%B；流速为0.30mL/min；柱温35℃；进样体积2μL；自动进样器温度为4℃；

MS/MS条件：

离子源电离方式：电喷雾电离；扫描方式：正离子模式扫描；毛细管电压：3.5Kv；雾化气压力40psi；脱溶剂气流速8L/min，350℃；干燥气流速8L/min，300℃；碰撞能量：20eV；破碎电压80V，在10-12分钟发现氰苷类化合物；

2）依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取上步骤得到的粗提物，得到不同极性萃取部位，正丁醇萃取部位经正向硅胶柱柱层析技术，以氯仿-甲醇系统为洗脱溶剂进行洗脱，CHCl₃:MeOH=10:0,10:1,5:1,20:7,0:10，V:V，共收集到83个流份，按照TLC分析结果，将成分极性相近的流份进行合并，粗分为13个组分，分别是组分Z1-Z13；

3）组分Z10选用凝胶柱色谱分离，甲醇装柱，V有效=1024cm³，以甲醇为洗脱溶剂，流速为5-7s/d，8-10mL一个流分，总共接到256个流分，通过硅胶薄层板合并为11个组分，分别是组分a1-a11，组分a3使用半制备液相进行等梯度分离，液相分离条件为MeOH:H₂O=90:10 V:V，获得该化合物20.00mg，tR=10.78min，经高分辨质谱和核磁谱，鉴定为化合物MenisdaurinF，其化学结构式如下：

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