[发明专利]一种氰苷类化合物Menisdaurin F在制备抗乙肝病毒药物组合物中的应用

说明书

本发明公开了一种氰苷类化合物Menisdaurin F在制备抗乙肝病毒药物组合物中的应用，以HepG2.2.15细胞为模型，利用不同浓度的化合物进行抑制HBV复制实验。结果表明，不同浓度的化合物对细胞增殖无抑制作用，在0.809mM时细胞上清中HBV DNA抑制率达到50％，同时能够显著降低细胞中X基因的表达。本发明为开发新的抗乙肝病毒药物提供了先导化合物，在抗乙肝病毒方面及其肝癌转变方面提供了药用价值。

【技术领域】

本发明涉及抗乙肝病毒治疗药物技术领域，涉及一种氰苷类化合物MenisdaurinF在制备抗乙肝病毒药物组合物中的应用。

【背景技术】

乙型病毒性肝炎是由乙型肝炎病毒(Hepatitis B Viru，HBV)感染引起，以肝脏炎性病变和肝肾功能的受损为主。HBV长期感染会发展为肝硬化、肝纤维化以及原发性肝细胞癌等与乙肝有关的疾病。全球每年死于HBV引发的肝癌患者超过100万，我国达到30万。治疗乙肝的根本目的是清除或永久抑制HBV病毒的复制，目前临床使用的抗病毒药物有核苷类似物和干扰素，然而二者都无法长久有效杀灭病毒，且引发的耐药性、药物副作用都成为临床不可忽视的问题。因此急需开发新型抗乙肝药物。

HBV长期感染及临床药物治愈率低源于病毒复制模板--cccDNA的稳定存在。HBV病毒时一种DNA病毒，遗传物质为双链松弛环状DNA，感染细胞后在细胞核中转化为游离共价闭合环状DNA(cccDNA)，其中HBV基因组编码的X蛋白(HBx)可与cccDNA结合，对于启动和维持cccDNA模板的转录至关重要。同时HBx还能作用于宿主细胞，介导细胞增殖凋亡、炎症侵袭和机体免疫调节过程，诱导肝癌的发生。因此，降低乙肝细胞中X基因的表达为抗乙肝药物的研发提供了新的方向。

西药主要以抗病毒治疗为主，中药采用的治疗方法有抗病毒、抗炎、保肝护肝和抗肝纤维化等。氰苷类为含腈基类化合物，其中非生氰苷类不易被酶解、水解或水解后无氰化氢生成，较为少见。现已有针对氰苷类的研究，例如，郭辉、张玲，垂盆草化学成分和药理作用的研究进展，食品与药品Food and Drug 2006年第8卷第01_A期，19-22，介绍了从垂盆草中分得1个水溶性氰苷类成分，命名为垂盆草苷，并确定其结构为2-氰基-4-O-β-D-葡萄糖-反丁烯-2-醇，以及其抗肝炎活性，临床研究表明，垂盆草对病毒性肝炎、黄疸性肝炎等各型肝炎有一定的疗效。又例如中国专利申请CN201110150588一种从菱叶红景天中提取生氰苷的方法，工艺步骤为：取菱叶红景天根，粉碎，加入乙醇，投入微波萃取装置中进行微波萃取，合并萃取液，滤过，减压回收乙醇并浓缩，用乙酸乙酯进行4-8级逆流萃取，加入到大孔吸附树脂柱上吸附，40-60％乙醇洗脱，收集3-8倍量柱体积洗脱液，减压回收溶剂并浓缩，加入甲醇结晶，分离结晶，洗涤、干燥即得生氰苷(Heterodendrin)，分子式：C₁₁H₁₉NO₆，分子量：261.274，CAS登录号：66465-22-3，主要存在于景天科、禾本科、豆科多种植物中，其中景天科植物菱叶红景天Rhodiola henryi(Diels)S.H.Fu中含量丰富，现代研究表明，生氰苷具有抗肿瘤作用，同时其也作为合成其它活性衍生物的原料。

从柴胡红景天分离得到的垂盆草苷属于氰苷类化合物，被证实对四氯化碳性肝损伤有明显保护作用，可使肝细胞内糖元和葡萄糖-6-磷酸酶、乳酸脱氢酶含量增加，肝细胞内琥珀酸脱氢酶和ATP酶的活性增强，可能通过该途径发挥保肝作用，进而研发抗乙肝病毒药物。

【发明内容】

针对现有技术中非生氰苷类不易被酶解、水解或水解后无氰化氢生成的问题，本发明一种氰苷类化合物Menisdaurin F在制备抗乙肝病毒药物组合物中的应用，研究表明：利用反转录技术和实时荧光定量PCR技术测定氰苷类化合物Menisdaurin F作用下X基因的表达。结果显示氰苷类化合物Menisdaurin F能显著降低HBx mRNA的表达水平。

为了实现上述目的，本发明所采用以下技术方案：