[发明专利]一种用于动物源性产品中金刚烷胺类药物残留的检测方法

权利要求书

1.一种用于动物源性产品中金刚烷胺类药物残留的检测方法，依照如下步骤进行：

样品预处理：称取1-2 g样品于50mL离心管中，加入10mL柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，10-50 μL氯化胆碱-对甲苯酚混合溶液、0.05-0.1 g经修饰的磁性分子印迹聚合物，涡旋、超声提取后，用磁力枪将磁性分子印迹粉末吸出；加入1 mL 0.2%甲酸甲醇洗脱液将样品中金刚烷胺类药物残留解析出来, 混匀后、过0.22 μm有机滤膜后，获得待测液；

2）待测液的检测：运用HPLC-MS/MS，在质谱ESI源下正离子模式下测定，内标法定量；

所述柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，按如下方法制备：称取16.8 g柠檬酸和5.88 g柠檬酸钠用纯水溶解，定容至1L；

所述氯化胆碱-对甲苯酚混合溶液，按如下方法制备：氯化胆碱、对甲苯酚、乙二醇单甲醚按0.1:0.25:1摩尔比例称取适量，在60℃恒定搅拌下加热 2 h 直至形成稳定的均匀透明的液体；将制备的混合溶液储存在密封的小瓶中并保存在干燥器中；

所述经修饰的磁性分子印迹聚合物，按如下方法制备：

(1)多壁碳纳米管粉末的修饰：将多壁碳纳米管粉末置于-18℃冰箱中冷冻1小时，称取3g多壁碳纳米管粉末，缓慢加入200 mL按3:1:0.1比例混合的硫酸-硝酸-异丙醇混合溶液中，超声反应1h，在80℃下加热搅拌反应2 h，抽滤，用蒸馏水涤至中性，于50℃真空干燥至恒重，研磨过筛备用；

（2）溶剂热法制备磁性碳纳米管粉末：称取5.410 g三氯化铁和3.475 g 硫酸亚铁置于250mL平底烧瓶中加入100 mL 水，60℃下恒温磁力搅拌，全部溶解后，迅速加入25mL氨水、2g步骤（1）制得的修饰后多壁碳纳米管粉末、5mL按1:1比例组成的乙二醇-聚乙二醇混合溶剂中，60℃下恒温磁力搅拌2h得到黑色的混合溶液，用乙醇和水洗数次，于50℃真空干燥至恒重，备用;

（3）将步骤（2）得到的溶剂热法制备磁性碳纳米管粉末、1 mmol金刚烷、5 mmol 甲基丙烯酸、5 mmol 丙烯酸 、1mL二甲基亚砜、50 mL 按9:1比例组成的乙醇-聚乙二醇混合溶液涡旋混合1min；再加入10 mmol 乙二醇二甲基丙烯酸酯、0. 2 g聚乙烯吡咯烷酮、0.010 g偶氮二异丁脐引发剂，通氮气密封，80℃水浴超声3h；反应结束后磁场分离除去上清液，剩余材料用9∶1体积比混合的甲醇-甲酸混合溶液反复超声洗涤，直至上清液经示差检测器检测不到模板分子为止；于50℃真空干燥至恒重，得到经修饰的磁性分子印迹聚合物；

所述金刚烷胺类药物为金刚烷胺、金刚乙胺和美金刚。

2.根据权利要求1所述的用于动物源性产品中金刚烷胺类药物残留的检测方法，其特征在于：

超高效液相色谱-三重四极杆质谱仪色谱条件为：

色谱柱：安捷伦SB-C18色谱柱，2.1×100 mm, 1.8 μm；流速：0.25 mL/min；进样量：2 μL；柱温：35 ℃；溶液A-0.1%甲酸水溶液，B-含0.1%甲酸的乙腈，梯度洗脱程序：0 min，10%B，0min -2.00 min，10% B-50% B，2.00 min – 4.00 min，50% -90% B，4.00min-5.00 min，90% B，5.00 min – 5.5 min，90%-10% B，5.50 min – 10.00 min,10% B；

超高效液相色谱-三重四极杆质谱仪质谱条件为：

离子源：电喷雾离子源；

喷雾压力： 40 psi；

干燥气流速： 11 L/min；

干燥气温度： 350 ℃；

毛细管电压： 4000 V；

监测模式： 正离子监测模式。