[发明专利]一种用于动物源性产品中金刚烷胺类药物残留的检测方法

说明书

本发明属于食品安全检测领域。技术方案是：一种用于动物源性产品中金刚烷胺类药物残留的检测方法，依照如下步骤进行：1)样品预处理：称取1‑2g样品于50mL离心管中，加入10mL柠檬酸‑柠檬酸钠缓冲溶液，10‑50μL氯化胆碱‑对甲苯酚混合溶液、0.05‑0.1g经修饰的磁性分子印迹聚合物，涡旋、超声提取后，用磁力枪将磁性分子印迹粉末吸出；加入1mL 0.2％甲酸甲醇洗脱液将样品中金刚烷胺类药物残留解析出来,混匀后、过0.22μm有机滤膜后，获得待测液；2)待测液的检测：运用HPLC‑MS/MS，在质谱ESI源下正离子模式下测定，内标法定量。该方法选择性好、灵敏度高、检测时间短。

技术领域

本发明属于食品安全检测领域，尤其涉及一种动物源性产品中金刚烷胺类药物残留的检测方法。

背景技术

金刚烷胺、金刚乙胺和美金刚均属于金刚烷胺类药物，该类药物在临床上能有效预防和治疗各种A型流感病毒的感染，同时也是帕金森综合症的治疗药物，在动物流感的治疗上也曾得到了广泛的应用，但是过量残留的金刚烷胺类药物会对动物神经系统产生较大危害。不仅会造成肉制品风味和品质下降，还会导致病毒抗药性与药物残留的产生，然后通过食物链影响消费者健康。农业部在2005年发布第560号公告中，明确规定抗病毒药物为禁用兽药；现国家标准针对动物源性食品中金刚烷胺类化合物检测发布了一系列测定方法。但样品前处理基本采用有机溶剂提取、脱脂,固相萃取净化等手段，操作较为繁琐、试剂消耗量大、检测耗时较长，具有一定的局限性。

多壁碳纳米管(MWCNT)具有较大的比表面积、丰富的孔隙结构在兽药残留检测中有着广泛的应用前景。但由于MWCNT表面缺少活性基团，亲水性较差，对复杂基质中的目标化合物的吸附效率低。直接使用具有一定的局限性，利用共价或非共价修饰的方式对MWCNT的表面进行改性，提高MWCNT的亲水性，是目前研究的热点。

分子印迹技术(molecularly imprinted technique,MIT)是制备对模板分子具有特异选择性识别能力的聚合物-分子印迹聚合物的技术。该聚合物对模板分子具有较高的选择识别能力,并且在较为恶劣的条件下，也不会丧失对目标分子结合的能力。分子印迹固相萃取技术由于选择性较强、稳定性好、易于制备而受到广泛关注，多壁碳纳米管修饰的磁性分子印迹聚合物采用表面印迹技术,在多壁碳纳米管磁性纳米粒子表面合成分子印迹壳层。不仅具有分子印迹的优势，能够特异性识别和吸附目标分子，而且能在磁场的作用下快速分离；同时由于多壁碳纳米管粒径较小，具有较大的比表面积，吸附容量较大，是一种更为理想的样品前处理手段。在兽药残留检测中有着广泛的应用前景。

发明内容

本发明的目的是克服动物源性产品中金刚烷胺类物质检测复杂的前处理手段，提供一种简便的金刚烷胺类药物残留的检测方法。该方法应具备选择性好、灵敏度高、检测时间短的特点，以提高检测效率。

为实现上述目的，本方法提供了如下技术方案：

一种用于动物源性产品中金刚烷胺类药物残留的检测方法，依照如下步骤进行：

1)样品预处理：称取1-2g样品于50mL离心管中，加入10mL柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，10-50μL氯化胆碱-对甲苯酚混合溶液、0.05-0.1g经修饰的磁性分子印迹聚合物，涡旋、超声提取后，用磁力枪将磁性分子印迹粉末吸出；加入1mL 0.2％甲酸甲醇洗脱液将样品中金刚烷胺类药物残留解析出来,混匀后、过0.22μm有机滤膜后，获得待测液；

2)待测液的检测：运用HPLC-MS/MS，在质谱ESI源下正离子模式下测定，内标法定量。

所述柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，按如下方法制备：称取16.8g柠檬酸(C₆H₈O₇·H₂O)和5.88g柠檬酸钠(Na₃C₆H₅O₇·2H₂O)用纯水溶解，定容至1L。