[发明专利]一种细胞高活性染色方法在审
申请号: | 202111059744.7 | 申请日: | 2021-09-10 |
公开(公告)号: | CN113804531A | 公开(公告)日: | 2021-12-17 |
发明(设计)人: | 王玮;浑婷婷;刘姚萍 | 申请(专利权)人: | 北京大学 |
主分类号: | G01N1/30 | 分类号: | G01N1/30;G01N1/31;G01N33/533;C12M1/42;C12N13/00 |
代理公司: | 北京润泽恒知识产权代理有限公司 11319 | 代理人: | 苟冬梅 |
地址: | 100871*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 细胞 活性 染色 方法 | ||
1.一种细胞高活性染色方法,其特征在于,所述方法包括:
将包含目标细胞的样本和特异性的直标抗体混合;
通过电极对所述样本中的目标细胞进行电穿孔标记,在标记过程中,所述特异性的直标抗体进入所述目标细胞,实现所述目标细胞的特异性标记;
对完成特异性标记的目标细胞进行静置处理,以使所述目标细胞的细胞膜复原。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在将包含目标细胞的样本和特异性的直标抗体混合之前,所述方法还包括:
对液基样本进行预处理,分离得到所述液基样本中的所述目标细胞。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述对液基样本进行预处理,分离得到所述液基样本中的所述目标细胞,包括:
利用高孔隙多孔滤膜对所述液基样本进行过滤,将所述目标细胞分离、富集在所述高孔隙多孔滤膜之上。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述高孔隙多孔滤膜的材料为聚对二甲苯,所述高孔隙多孔滤膜整体的大小范围为1mm2~400mm2;所述高孔隙多孔滤膜的膜孔为六边形膜孔,所述高孔隙多孔滤膜的模孔直径范围是2μm~100μm,孔间距小于10μm。
5.根据权利要求3或4任一所述的方法,其特征在于,所述通过电极对所述目标细胞进行电穿孔标记,包括:将所述高孔隙多孔滤膜置于电极对之间,所述电极对连接一外部电脉冲发生器,所述电脉冲发生器向所述电极对施加电脉冲,以对所述目标细胞进行电穿孔标记。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述特异性的直标抗体与传统免疫荧光染色所用抗体一致,用于特异性标记所述目标细胞。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在对完成特异性标记的目标细胞进行静置处理之后,所述方法还包括:
对完成特异性标记的目标细胞进行原位培养,以对所述目标细胞进行下游分析。
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