[发明专利]一种细胞高活性染色方法在审

专利信息
申请号: 202111059744.7 申请日: 2021-09-10
公开(公告)号: CN113804531A 公开(公告)日: 2021-12-17
发明(设计)人: 王玮;浑婷婷;刘姚萍 申请(专利权)人: 北京大学
主分类号: G01N1/30 分类号: G01N1/30;G01N1/31;G01N33/533;C12M1/42;C12N13/00
代理公司: 北京润泽恒知识产权代理有限公司 11319 代理人: 苟冬梅
地址: 100871*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 细胞 活性 染色 方法
【权利要求书】:

1.一种细胞高活性染色方法,其特征在于,所述方法包括:

将包含目标细胞的样本和特异性的直标抗体混合;

通过电极对所述样本中的目标细胞进行电穿孔标记,在标记过程中,所述特异性的直标抗体进入所述目标细胞,实现所述目标细胞的特异性标记;

对完成特异性标记的目标细胞进行静置处理,以使所述目标细胞的细胞膜复原。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在将包含目标细胞的样本和特异性的直标抗体混合之前,所述方法还包括:

对液基样本进行预处理,分离得到所述液基样本中的所述目标细胞。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述对液基样本进行预处理,分离得到所述液基样本中的所述目标细胞,包括:

利用高孔隙多孔滤膜对所述液基样本进行过滤,将所述目标细胞分离、富集在所述高孔隙多孔滤膜之上。

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述高孔隙多孔滤膜的材料为聚对二甲苯,所述高孔隙多孔滤膜整体的大小范围为1mm2~400mm2;所述高孔隙多孔滤膜的膜孔为六边形膜孔,所述高孔隙多孔滤膜的模孔直径范围是2μm~100μm,孔间距小于10μm。

5.根据权利要求3或4任一所述的方法,其特征在于,所述通过电极对所述目标细胞进行电穿孔标记,包括:将所述高孔隙多孔滤膜置于电极对之间,所述电极对连接一外部电脉冲发生器,所述电脉冲发生器向所述电极对施加电脉冲,以对所述目标细胞进行电穿孔标记。

6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述特异性的直标抗体与传统免疫荧光染色所用抗体一致,用于特异性标记所述目标细胞。

7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在对完成特异性标记的目标细胞进行静置处理之后,所述方法还包括:

对完成特异性标记的目标细胞进行原位培养,以对所述目标细胞进行下游分析。

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