[发明专利]一种联合检测EGFR基因突变的试剂和试剂盒有效
申请号: | 202111066497.3 | 申请日: | 2021-09-13 |
公开(公告)号: | CN113755590B | 公开(公告)日: | 2023-09-22 |
发明(设计)人: | 宗莹;赵明玉;牛力 | 申请(专利权)人: | 北京乐土医学检验实验室有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6886 | 分类号: | C12Q1/6886;C12Q1/6858;C12N15/11 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 苏士莹 |
地址: | 102206 北京市昌平区回龙观镇中*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 联合 检测 egfr 基因突变 试剂 试剂盒 | ||
1.一种联合检测EGFR基因突变的试剂,其特征在于,所述试剂包括根据EGFR基因突变位点设计的特异性引物对;
所述EGFR基因突变位点包括:T790M、L858R、19号外显子缺失、G719X、20号外显子插入、S768I、L861Q、C797S和C797S-T790M;
针对T790M设计的特异性引物对包括T790M-F和T790M-R,针对T790M设计的特异性探针包括T790M-P,所述T790M-F的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述T790M-R的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,所述T790M-P的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示;
针对L858R设计的特异性引物对包括L858R-F和L858R-R,针对L858R设计的特异性探针包括L858R-P,所述L858R-F的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示,所述L858R-R的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示,所述L858R-P的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示;
针对19号外显子缺失设计的特异性引物对包括19del-F1、19del-F2、19del-F3、19del-F4、19del-F5、19del-F6和19del-R,针对19号外显子缺失设计的特异性探针包括19del-P,所述19del-F1的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示,所述19del-F2的核苷酸序列如SEQ IDNO.8所示,所述19del-F3的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示,所述19del-F4的核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示,所述19del-F5的核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示,所述19del-F6的核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示,所述19del-R的核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示,所述19del-P的核苷酸序列如SEQ ID NO.14所示;
针对G719X设计的特异性引物对包括G719X-F1、G719X-F2、G719X-F3和G719X-R,针对G719X设计的特异性探针包括G719X-P;所述G719X-F1的核苷酸序列如SEQ ID NO.16所示,所述G719X-F2的核苷酸序列如SEQ ID NO.17所示,所述G719X-F3的核苷酸序列如SEQ IDNO.18所示,所述G719X-R的核苷酸序列如SEQ ID NO.19所示,所述G719X-P的核苷酸序列如SEQ ID NO.20所示;
针对20号外显子插入设计的特异性引物对包括20INS-F1、20INS-F2和20INS-R,针对20号外显子插入设计的特异性探针包括20INS-P,所述20INS-F1的核苷酸序列如SEQ IDNO.21所示,所述20INS-F2的核苷酸序列如SEQ ID NO.22所示,所述20INS-R的核苷酸序列如SEQ ID NO.23所示,所述20INS-P的核苷酸序列如SEQ ID NO.24所示;
针对S768I设计的特异性引物对包括S768I-F和S768I-R,针对S768I设计的特异性探针包括S768I-P,所述S768I-F的核苷酸序列如SEQ ID NO.25所示,所述S768I-R的核苷酸序列如SEQ ID NO.26所示,所述S768I-P的核苷酸序列如SEQ ID NO.27所示;
针对L861Q设计的特异性引物对包括L861Q-F和L861Q-R,针对L861Q设计的特异性探针包括L861Q-P,所述L861Q-F的核苷酸序列如SEQ ID NO.29所示,所述L861Q-R的核苷酸序列如SEQ ID NO.30所示,所述L861Q-P的核苷酸序列如SEQ ID NO.31所示;
针对C797S设计的特异性引物对包括C797S-F、C797S-R1和C797S-R2,针对C797S设计的特异性探针包括C797S-P,所述C797S-F的核苷酸序列如SEQ ID NO.32所示,所述C797S-R1的核苷酸序列如SEQ ID NO.33所示,所述C797S-R2的核苷酸序列如SEQ ID NO.34所示,所述C797S-P的核苷酸序列如SEQ ID NO.35所示;
针对C797S-T790M设计的特异性引物对包括C797S-T790M-F、C797S-T790M-R1和C797S-T790M-R2,针对C797S-T790M设计的特异性探针包括C797S-T790M-P,所述C797S-T790M-F的核苷酸序列如SEQ ID NO.36所示,所述C797S-T790M-R1的核苷酸序列如SEQ ID NO.37所示,所述C797S-T790M-R2的核苷酸序列如SEQ ID NO.38所示,所述C797S-T790M-P的核苷酸序列如SEQ ID NO.39所示。
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