[发明专利]一种甘蔗茎尖培养的改良方法

权利要求书

1.一种甘蔗茎尖培养的改良方法，其特征在于,包括以下步骤：

选取甘蔗尾梢的茎尖为外植体，在40-45℃热激处理之后,接种于改良MS培养基中，培养至长出新的侧芽；

其中，培养期间，自接种第5天开始每天进行冷刺激1-3次，持续10-18天；所述改良MS培养基包括以下组分：MS+0.05-0.15mg/L噻苯隆+0.1-0.25mg/L 6-BA+蔗糖20-30g/L。

2.如权利要求1所述的甘蔗茎尖培养的改良方法，其特征在于，热激处理之前，先剥去尾梢外层叶鞘，露出生长点，并切取生长点下2-3mm的叶原基，然后用75％酒精浸泡25-30s，再用清水冲洗3-5次。

3.如权利要求1所述的甘蔗茎尖培养的改良方法，其特征在于，所述甘蔗茎尖在40-45℃无菌水中热激2-3min。

4.如权利要求1所述的甘蔗茎尖培养的改良方法，其特征在于，培养期间冷刺激的方式具体为：自接种第5天开始每天冷刺激3次，之后每间隔5天每天冷刺激次数减少1次，直至减少到每天冷刺激1次，并持续5天。

5.如权利要求4所述的甘蔗茎尖培养的改良方法，其特征在于，每天冷刺激的时间为：5点和/或9点和/或21点；

冷刺激温度为0-4℃，每次冷刺激持续20-30s。

6.如权利要求1所述的甘蔗茎尖培养的改良方法，其特征在于，还包括培养所述甘蔗茎尖的专用培养装置；

其中，所述专用培养装置包括：培养瓶和悬置于所述培养瓶的茎尖承载装置；

所述培养瓶为具有开口的柱形瓶体；

所述茎尖承载装置包括第一承载部、第二承载部以及钩体，所述第一承载部和所述第二承载部均为一端开口的网状筒体结构，所述第一承载部的开口外侧设置外螺纹，所述第二承载部的开口内侧设置内螺纹，所述第一承载部和所述第二承载部通过所述内螺纹和所述外螺纹可拆卸连接；所述第一承接部未开口端与所述钩体的一端固定连接，所述钩体的另一端悬挂在所述培养瓶的开口处。

7.如权利要求6所述的甘蔗茎尖培养的改良方法，其特征在于，利用所述专用培养装置培养所述甘蔗茎尖的方法包括以下步骤：

将改良MS培养基装入所述培养瓶中，同时在所述第二承载部内装入柑橘果肉，且所述柑橘果肉底部和顶部分别铺设滤纸，再将所述第一承载部与所述第二承载部通过螺纹旋拧固定，然后将经过热激处理的茎尖放置于所述第一承载部顶面外壁，并通过所述钩体将放置有茎尖的茎尖承载装置悬挂于所述培养瓶中，密封培养直至长出新的侧芽；当所述钩体悬挂于所述培养瓶时，所述改良MS培养基的添加量以不淹没所述第一承载部上的茎尖为准。

8.如权利要求7所述的利用专用培养装置培养甘蔗茎尖的方法，其特征在于，所述第一承载部与所述第二承载部通过螺纹旋拧固定时，所述滤纸贴附于所述第一承载部顶面内壁。

9.如权利要求7所述的利用专用培养装置培养甘蔗茎尖的方法，其特征在于，还包括：培养期间进行冷刺激，将所述专用培养装置置于0-4℃无菌环境中进行短暂的间断性的冷刺激。

10.如权利要求7所述的利用专用培养装置培养甘蔗茎尖的方法，其特征在于，所述钩体为L型钩子或S型钩子。