[发明专利]一种能显著增强杀伤活性的NK细胞扩增方法在审
| 申请号： | 202111069646.1 | 申请日： | 2021-09-13 |
| 公开（公告）号： | CN113862223A | 公开（公告）日： | 2021-12-31 |
| 发明（设计）人： | 张尚权 | 申请（专利权）人： | 埃尔利生物技术（上海）有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783;C12N5/10;C12N15/866;C12N15/24;C12N15/26;C12N15/23;C12N7/01 |
| 代理公司： | 上海湾谷知识产权代理事务所(普通合伙) 31289 | 代理人： | 倪继祖 |
| 地址： | 201315 上海市浦*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 显著 增强 杀伤 活性 nk 细胞 扩增 方法 | ||
1.一种能显著增强杀伤活性的NK细胞扩增方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)构建含有NK扩增所需的细胞因子基因且带有哺乳动物启动子的重组杆状病毒；
(2)利用步骤(1)制备的重组杆状病毒对MSC细胞进行感染；
(3)将步骤(2)中感染后的MSC细胞加入已活化培养的NK细胞中共培养,共培养24-60小时后，NK细胞再继续传代扩增培养；
其中，所述步骤(1)中所述细胞因子为IL-2、IL-15、IL-21、IFN-γ中的至少一种。
2.根据权利要求1所述的能显著增强杀伤活性的NK细胞扩增方法，其特征在于，所述步骤(3)中，所述MSC细胞和NK细胞按照1:5-20的细胞数量比例混合共培养。
3.根据权利要求2所述的能显著增强杀伤活性的NK细胞扩增方法，其特征在于，所述步骤(3)中，所述MSC细胞和NK细胞按照1:8-12的细胞数量比例混合共培养。
4.根据权利要求1所述的能显著增强杀伤活性的NK细胞扩增方法，其特征在于，所述步骤(1)具体为：分别构建含IL-2、IL-15、IL-21和IFN-γ基因的质粒载体；分别用上述质粒载体制备带有哺乳动物启动子的重组杆状病毒。
5.根据权利要求1至4任一项所述的能显著增强杀伤活性的NK细胞扩增方法，其特征在于，所述步骤(1)中的哺乳动物启动子为CMV。
6.根据权利要求1所述的能显著增强杀伤活性的NK细胞扩增方法，其特征在于，所述步骤(3)中所述已活化培养的NK细胞是被IL-2活化的。
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