[发明专利]一种草甘膦快速间接检测方法

权利要求书

1.一种草甘膦快速间接检测方法，其特征在于：其方法如下所述：

步骤一、样品中草甘膦残留的提取液的制备：

1)针对土壤样品，一份用于测定干物质的含量，即在高温条件下烘至恒重，以烘干前后的土壤样品质量差值计算干物质和水分的含量；另一份采用离心去除水分后，加入磷酸钠和柠檬酸钠混合，超声提取草甘膦残留，离心获得上清液用滤纸过滤，作为提取液备用；

2)针对固体食品样品，采用水浸提，再加入二氯甲烷，振荡后离心，取水层；残渣再加入水重复浸提，合并两次上清液，作为提取液备用；

3)针对液体食品样品，加入少量盐酸，离心后取上清液，再加入二氯甲烷，振荡后离心，取上清液水层，作为提取液备用；

4)针对水体样品，不经过提取，直接进行步骤二中的净化操作；

步骤二、提取液的净化：

1)针对土壤样品提取液，加入少量浓盐酸，静置后用滤纸过滤得到上清液；加入正己烷，振荡后静置，弃去有机相；水相用正己烷再萃取一次，并用滤膜过滤，得到净化后的提取液待衍生；

2)针对食品样品提取液，利用活化后CAX小柱净化，并用CAX洗脱液淋洗并收集，减压旋转蒸发近干，加入少量水溶解残渣，用滤膜过滤，得到净化后的提取液待衍生；

3)针对水体样品，静置后用滤纸过滤得到上清液，用滤膜过滤净化，得到净化后的提取液备用；

步骤三、茚三酮工作液的配制：茚三酮工作液由茚三酮、水、醋酸-醋酸钠缓冲液组成，茚三酮、水和醋酸缓冲液的体积比为1：1：1-3：1：1，其中，茚三酮浓度为5％，醋酸-醋酸钠缓冲液浓度为0.4mol·L^-1，pH值为5.5；

步骤四、提取液的衍生：取步骤二中净化后得到的提取液，加入茚三酮工作液，再加入浓度为1％-10％钼酸钠作为催化剂，在80-100℃的条件下，衍生时间为20-40min，得到类似罗曼紫的物质，类似罗曼紫的物质紫外吸收峰在560-600nm之间，提取液、茚三酮工作液和钼酸钠催化剂的体积比为1：1：1-3：1：1；

步骤五、Ag NPs的制备：AgNO₃分散在超纯水中，加热沸腾后加入柠檬酸钠，温度降低后，得到灰绿色胶体，冷却至室温备用,AgNPs的紫外吸收峰在400nm-450nm之间；

步骤六、衍生液的测定：吸取步骤四中衍生后的提取液，加入步骤五中的AgNPs，利用紫外可见分光光度计检测560-600nm之间吸光度，利用空白样品建立标准曲线，并计算草甘膦的含量，步骤五中制得的AgNPs灰绿色胶体与类似罗曼紫物质的重量百分比为1：1-3：1；

步骤七、草甘膦含量的计算：利用空白样品建立标准曲线，并计算草甘膦的含量，按照以下公式(1)和(2)计算：

样品中草甘膦浓度的单位为mol/L；

土壤样品由于水分的影响，还需要进一步的计算：

其中w为土壤样品中草甘膦的浓度，单位mg/kg；

ρ为标准曲线计算所得的草甘膦浓度，单位μg/L；

V_s为新鲜土壤样品的含水量，单位mL；

V₁为提取液体积，单位mL；

m为样品湿重，单位g；

w_dm为土壤样品中的干物质含量，单位％。