[发明专利]一种使用至少八种脂肪酸代谢关键酶基因检测方法以及试剂盒

权利要求书

1.一种脂肪酸代谢水平的检测方法，其特征在于，所述方法通过检测脂肪酸代谢关键酶基因来指示脂肪酸代谢水平，所述脂肪酸代谢关键酶基因由肉碱脂酰转移酶、脂酰CoA合成酶、脂酰CoA脱氢酶、烯酰CoA水化酶、β-酮硫解酶组成，其中肉碱脂酰转移酶为CPT1a、CPT1b和CPT2，脂酰CoA合成酶为ACSL1，脂酰CoA脱氢酶为ACADVL和ACADM，烯酰CoA水化酶为ECH1，β-酮硫解酶为HADHA。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，还可以进一步检测肉碱脂酰转移酶CPT1c以及甘油醛-3-磷酸脱氢酶GAPDH。

3.一种检测脂肪酸代谢水平的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中含有检测脂肪酸代谢关键酶基因的试剂，所述试剂用以指示脂肪酸代谢水平，所述脂肪酸代谢关键酶基因由肉碱脂酰转移酶、脂酰CoA合成酶、脂酰CoA脱氢酶、烯酰CoA水化酶、β-酮硫解酶组成，其中肉碱脂酰转移酶为CPT1a、CPT1b和CPT2，脂酰CoA合成酶为ACSL1，脂酰CoA脱氢酶为ACADVL和ACADM，烯酰CoA水化酶为ECH1，β-酮硫解酶为HADHA。

4.根据权利要求3所述试剂盒，所述试剂盒中进一步含有检测肉碱脂酰转移酶CPT1c以及甘油醛-3-磷酸脱氢酶GAPDH的试剂。

5.根据权利要求3或4所述试剂盒，其特征在于，其特征在于，所述试剂盒为PCR试剂盒，所述试剂盒中含有PCR检测所必需的试剂。

6.根据权利要求3或4所述试剂盒，其特征在于，所述检测脂肪酸代谢关键酶基因基因的试剂为PCR检测引物，所述引物如下：

①肉碱脂酰转移酶(carnitine acyl transferase)，CPT

CPT1a：

Forward:CTCAGTGGGAGCGACTCTTCA

Reverse:GGCCTCTGTGGTACACGACAA

CPT1b：

Forward:TGGTGGGCAACTAACTATGTGA

Reverse:TCCAGTTTGCGGCGATACAT

CPT2：

Forward:ATGACAGCCAGTTCAGGAAGACA

Reverse:TAAAACGACAGAGTCTCGAGCAG

②脂酰CoA合成酶(acyl-CoA synthetase)

ACSL1：

Forward:AGTGGAACTACAGGCAACCC

Reverse:CAGCACATCATCTGTGGAAGC

③脂酰CoA脱氢酶(acyl CoA dehydrogenase)

ACADVL:

Forward:GCCAAGCTGGTGAAACACAA

Reverse:TCCGAGTTGCAGCCTCAATG

ACADM:

Forward:AGAACCAGACCTACAGTCGCA

Reverse:TGAGCCTAGCGAGTTCAACC

④烯酰CoA水化酶(enoyl CoA hydratase)

ECH1:

Forward:CTGTCATTGAGAAGTGCCCCAA

Reverse:AGCAGCCAAGCCCATATCTAC

⑤β-酮硫解酶(beta-ketothiolase deficiency,BDK)

HADHA:product size 249bp

Forward:AGGACCTCGGTGTAAAGCAC

Reverse:TAGTGCATGCCGATCACCTTC。