[发明专利]一种使用至少八种脂肪酸代谢关键酶基因检测方法以及试剂盒

说明书

本发明提供了一种脂肪酸代谢关键酶基因检测方法以及试剂盒，具体涉及使用八种或十种脂肪酸代谢关键酶基因进行检测的方法。

技术领域

本发明涉及基因检测领域，特别是涉及一种使用至少八种脂肪酸代谢关键酶基因检测方法以及试剂盒。

背景技术

代谢组学(Metabolomics/Metabonomics)是20世纪90年代末期发展起来的一门新兴学科，它是通过考察生物体系在遗传改变或受刺激或扰动后，其代谢产物的变化或其随时间的变化，来研究生物体系的一门科学。所谓代谢组(Metabolome)是基因组的下游产物也是最终产物，是一些参与生物体新陈代谢、维持生物体正常功能和生长发育的小分子化合物的集合，主要是相对分子质量小于1000的内源性小分子，这些内源性代谢小分子涉及糖代谢、能量代谢、脂代谢、氨基酸代谢、核酸代谢、辅酶代谢等。

正常状态下的生物体是一个完整的系统，生物体液、细胞和组织中的代谢物处于一个稳定的平衡状态。机体由于遗传或者后天原因发生了病理变化，这一平衡就被打破，代谢产物和代谢过程也产生了相应的变化。通过代谢组学分析了解小分子代谢在疾病过程中的变化，可以帮助人们寻找有关的生物标志物(biomarker)，可以辅助疾病的诊断，也可以帮助人们通过小分子物质本身涉及的代谢通路了解疾病的发病机制并为药物研发提供特异性的靶标。近年来，代谢组学在人类各类疾病的研究中在疾病的早期诊断中取得了诸多具有重大意义的研究成果，如心血管疾病、糖尿病和癌症，相关论文发表在学术期刊《Nature》、《Nature medicine》、《Journal of hepatology》和《Cancer research》上，展现了代谢小分子在人类疾病诊断中巨大的潜力与价值。

其中，脂肪酸代谢的研究越来越受到重视，脂肪酸是指一端含有一个羧基的长的脂肪族碳氢链，是机体主要能量来源之一。脂肪酸根据碳链的长短可分为短链、中链、长链脂肪酸；根据饱和度的不同可分为饱和、单不饱和、多不饱和脂肪酸。人和动物体内脂肪酸主要是长链脂肪酸，其来源一是机体自身合成，二是食物供给。脂肪酸在生命过程中具有非常重要的作用。研究表明，诸如高血压、血脂紊乱、肥胖、胰岛素抵抗、心脑血管疾病及肿瘤等多种疾病都与脂肪酸代谢异常有关。

目前，脂肪酸检测的分析方法多集中在气相色谱-质谱联用(GC-MS)方法，以及高效液相色谱与质谱联用(HPLC-MS)方法，然而上述方法具有定量不够准确，灵敏度欠佳，稳定性差、进样前需进行繁琐的预处理，费时、费力等缺点。临床医学上很多疾病和脂肪酸的变化有密切关系，机体器官生理和病理变化往往会引起体内脂肪酸成分的改变，检测机体中脂肪酸的水平，对研究不同条件下血脂代谢情况，诊断某种脂肪酸水平异常引起的疾病以及调整补充机体所需、改善营养疗效等方面具有重要意义。因此对脂肪酸代谢的检测对及时了解脂肪酸代谢疾病非常重要，更方便、快捷、准确的脂肪酸检测方法还有待研究者的进一步研究。

目前使用PCR等生物检测手段检测脂肪酸代谢的方法较少，一般均需要实验人员自行选择相关基因且需自行设计引物，而脂肪酸代谢通路基因较多，全部进行检测费时且成本高，选取部分基因又容易遗漏脂肪酸代谢检测的关键步骤，且自行设计的引物往往需要进行大量的检测及预实验才能找到合适的引物及实验条件，且目前市场上还没有相关的试剂盒。

异常代谢是人类癌症发展的标志，在癌症进展和化疗失败中起重要作用。各种实验和临床研究表明，脂肪酸代谢可能有利于肿瘤细胞生长和化疗失败，这表明异常代谢是癌细胞的独特脆弱性和癌症治疗的有希望的靶标。例如，脂肪细胞通过将脂肪酸转移到脂肪酸氧化(FAO)的高活化肿瘤细胞中来促进转移性细胞的增殖。研究癌细胞对脂肪酸代谢的依赖将为癌症患者提供潜在的个性化治疗，且通过脂肪酸代谢情况能够指示抗癌剂为肥胖患者结直肠癌的特异性、灵敏性的早期诊断和精准治疗提供指导方案，改善肥胖结直肠癌患者的预后。

发明内容