[发明专利]一种基因缺失的减毒非洲猪瘟病毒构建及其作为疫苗的应用在审
申请号: | 202111079587.6 | 申请日: | 2021-09-15 |
公开(公告)号: | CN114272365A | 公开(公告)日: | 2022-04-05 |
发明(设计)人: | 陈鸿军;刘英楠;谢振华;宋庆庆;狄栋栋;龚浪;王衡 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心);金宇保灵生物药品有限公司;华南农业大学 |
主分类号: | A61K39/12 | 分类号: | A61K39/12;A61P31/20;C12N7/04;C12N15/34 |
代理公司: | 北京市诚辉律师事务所 11430 | 代理人: | 范盈 |
地址: | 200241 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基因 缺失 非洲 猪瘟 病毒 构建 及其 作为 疫苗 应用 | ||
1.一种基因缺失的减毒非洲猪瘟病毒疫苗,其特征在于,所述减毒非洲猪瘟病毒疫苗是含有I73R基因缺失或联合其他基因的多个基因缺失的非洲猪瘟病毒减毒株。
2.如权利要求1所述的一种基因缺失的减毒非洲猪瘟病毒疫苗,其中所述缺失是指完全缺失或基因序列的部分缺失或单个核苷酸的突变。
3.如权利要求1所述的一种基因缺失的减毒非洲猪瘟病毒疫苗的制备方法,包括以下步骤:
1)I73R基因缺失病毒的构建
以pUC-19质粒或类似质粒为载体,以I73R基因为目标,构建含该目的基因左右同源臂以及使用p72病毒蛋白启动子调控的EGFP基因替换I73R基因的重组质粒,通过转染BMDM细胞随后感染ASFV亲本毒株的同源重组方式,筛选并纯化得到目的基因缺失的重组病毒ASFV△I73R;
2)疫苗的制备
将步骤1)中构建的病毒接种原代肺泡巨噬细胞,扩大培养,收获病毒液并测定滴度;以103TCID50以上的病毒液制成疫苗。
4.如权利要求1所述的一种基因缺失的减毒非洲猪瘟病毒疫苗在制备治疗和\或预防非洲猪瘟的药物中的应用。
5.如权利要求4所述的应用,其特征在于如权利要求1所述的一种基因缺失的减毒非洲猪瘟病毒疫苗可与任何形式的佐剂、免疫调节剂同时使用;也可与其他猪用疫苗联合制备使用。
6.一种包含权利要求1所述的一种基因缺失的减毒非洲猪瘟病毒疫苗的药物组合物。
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