[发明专利]一种昆仙胶囊24种成分同时定量的分析方法

权利要求书

1.一种昆仙胶囊24种成分同时定量的分析方法，其特征在于，包括以下步骤：

第一步，供试品溶液的制备：

将昆仙胶囊内容加入70％甲醇中，超声1～30min，离心分离，取上清液和内标溶液，用70％甲醇定容，过微孔滤膜，取续滤液得到供试品溶液；

第二步，对照品溶液和混合对照品溶液的制备：

精密称定雷公藤定碱、雷公藤次碱、雷公藤晋碱、朝藿定A、朝藿定A1、朝藿定C、朝藿定B、雷公藤新碱、淫羊藿苷、箭藿苷B、宝藿苷I、金丝桃苷、雷公藤红素、紫云英苷、雷公藤甲素、雷酚内酯、箭藿苷A、2″-O-鼠李糖基淫羊藿次苷II、异槲皮苷、新绿原酸、隐绿原酸、绿原酸、槲皮素、山柰酚对照品及茯苓酸，用甲醇溶解并稀释至刻度，分别得到各化合物的对照品溶液；

混合对照品溶液：将上述制备的各对照品溶液分别用70％甲醇稀释，配制成系列梯度浓度的混合对照品溶液；

第三步，采用超高效液相色谱-电喷雾串联三重四级杆质谱检测供试品溶液、对照品溶液和混合对照品溶液中的成分，同时确定了昆仙胶囊中的24种成分，分别为雷公藤定碱、雷公藤次碱、雷公藤晋碱、朝藿定A、朝藿定A1、朝藿定C、朝藿定B、雷公藤新碱、淫羊藿苷、箭藿苷B、宝藿苷I、金丝桃苷、雷公藤红素、紫云英苷、雷公藤甲素、雷酚内酯、箭藿苷A、2″-O-鼠李糖基淫羊藿次苷II、异槲皮苷、新绿原酸、隐绿原酸、绿原酸、槲皮素、山柰酚；

所述超高效液相色谱的条件：色谱柱Agilent ZORBAXSB C18，流动相A为甲醇，B为含0.2％甲酸的10mmol/L乙酸铵水溶液；梯度洗脱程序为0～1.0min，10％～15％A；1.0～2.0min，15％～65％A；2.0～8.5min，65％～95％A；8.5～9.0min，95％A，流速0.4mL/min，柱温35℃，进样量5μL；

所述电喷雾串联三重四级杆质谱的条件：离子源为ESI；检测模式：正、负离子模式；扫描方式：多反应监测MRM；喷雾电压：4000V；离子源温度：350.0℃。

2.根据权利要求1所述的昆仙胶囊24种成分同时定量的分析方法，其特征在于，所述第一步供试品溶液的制备如下：

取昆仙胶囊内容约0.15g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加70％甲醇20mL，超声20min，14500rpm离心20min，取上清液和内标溶液各1mL，转移至10mL容量瓶中，70％甲醇定容，过0.22μm微孔滤膜，取续滤液得到供试品溶液。

3.根据权利要求1所述的昆仙胶囊24种成分同时定量的分析方法，其特征在于，所述第二步对照品及混合对照品溶液的制备如下：

精密称定约2.00mg的雷公藤定碱、雷公藤次碱、雷公藤晋碱、朝藿定A、朝藿定A1、朝藿定C、朝藿定B、雷公藤新碱、淫羊藿苷、箭藿苷B、宝藿苷I、金丝桃苷、雷公藤红素、紫云英苷、雷公藤甲素、雷酚内酯、箭藿苷A、2″-O-鼠李糖基淫羊藿次苷II、异槲皮苷、新绿原酸、隐绿原酸、绿原酸、槲皮素、山柰酚对照品及茯苓酸，分别用甲醇溶解并稀释至2mL，分别得到各化合物的对照品储备溶液；

将上述制备的各对照品溶液分别用70％甲醇稀释，配制成混合对照品溶液。