[发明专利]一种昆仙胶囊24种成分同时定量的分析方法

说明书

本发明公开了一种昆仙胶囊24种成分同时定量的分析方法，包括以下步骤：供试品溶液的制备：对照品溶液和混合对照品溶液的制备：采用超高效液相色谱‑电喷雾串联三重四级杆质谱检测供试品溶液、对照品溶液和混合对照品溶液中的成分，同时确定了昆仙胶囊中的24种成分，分别为雷公藤定碱、雷公藤次碱、雷公藤晋碱、朝藿定A、朝藿定A1、朝藿定C、朝藿定B、雷公藤新碱、淫羊藿苷、箭藿苷B、宝藿苷I、金丝桃苷、雷公藤红素、紫云英苷、雷公藤甲素、雷酚内酯、箭藿苷A、2″‑O‑鼠李糖基淫羊藿次苷II、异槲皮苷、新绿原酸、隐绿原酸、绿原酸、槲皮素、山柰酚。该方法具有专属性强、灵敏度高、分析时间短的特点。

技术领域

本发明属于药物分析技术领域，具体地说，涉及一种昆仙胶囊24种成分同时定量的分析方法。

背景技术

昆仙胶囊(KC)是国家中医药重点科技攻关项目成果，是由昆明山海棠、淫羊藿、枸杞子和菟丝子四味中药组成的纯中药复方制剂，有补肾通络，祛风除湿之功效，用于治疗类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、慢性肾炎等免疫性疾病的治疗(张宁，易无庸.昆仙胶囊临床应用进展[J].中医临床研究，2014，6(07):147-148.)。药理学研究也表明KC具有抗炎、抗肿瘤、免疫抑制等作用，其可能与其含有生物碱、萜类、黄酮类、糖苷类等多种有效成分有关。譬如，萜类成分雷公藤甲素，黄酮类成分朝藿定B和淫羊藿苷等，均具有明显的抗炎、保护骨组织损伤等作用(Su Z,Sun H,Ao M,Zhao C.Atomic Force Microscopy Study ofthe Anti-inflammatory Effects of Triptolide on Rheumatoid ArthritisFibroblast-like Synoviocytes. Microsc Microanal[J].2017,23(5):1002-1012；XiaoHH,Fung CY,Mok SK,et al.Flavonoids from Herba epimedii selectively activateestrogen receptor alpha(ERα)and stimulate ER-dependent osteoblastic functionsin UMR-106 cells[J].J Steroid Biochem Mol Biol.2014,143:141-51.)。但昆明山海棠中的生物碱及萜类成分又表现出一定的毒副作用(Tang Y,Zhang Y,Li L,et al. KunxianCapsule for Rheumatoid Arthritis:Inhibition of Inflammatory Network andReducing Adverse Reactions Through Drug Matching[J].Front Pharmacol.2020,11:485.)。为此，对该方剂中的有效及毒性成分进行含量监测，是保证患者用药安全、有效的关键。

目前，KC的质量控制主要以国家食品药品监督管理局颁布的国家药品标准(YBZ07522006-2009Z)为生产准则，含量测定项下仅监测了KC中的雷公藤甲素和淫羊藿苷的含量。虽然前期采用HPLC法建立了KC的特征图谱及多种黄酮类成分的定量分析方法，但是由于昆明山海棠中的雷公藤晋碱、雷公藤甲素等化学成分紫外吸收较弱，部分还是方中的微量毒效成分，难以运用普通的HPLC技术对这些成分进行同时检测。近年来兴起的超高效液相色谱-电喷雾串联三重四级杆质谱(UHPLC-MS/MS)由于其分离速度快、灵敏度高、测定准确性强的特点，已广泛用于中药及复方的分析中，尤其是微量成分的研究(Pichini S,Mannocchi G,Gottardi M,et al.Fast and sensitive UHPLC-MS/MS analysis ofcannabinoids and their acid precursors in pharmaceutical preparations ofmedical cannabis and their metabolites in conventional and non-conventionalbiological matrices of treated individual[J].Talanta.2020, 209:120537.)。