[发明专利]一种基于CRISPR系统的分子侧向层析检测方法及检测试纸条在审
申请号: | 202111086411.3 | 申请日: | 2021-09-16 |
公开(公告)号: | CN113687066A | 公开(公告)日: | 2021-11-23 |
发明(设计)人: | 李诗焱 | 申请(专利权)人: | 固安北吉生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/558 | 分类号: | G01N33/558;G01N33/543 |
代理公司: | 南京佰腾智信知识产权代理事务所(普通合伙) 32509 | 代理人: | 黄杭飞 |
地址: | 065000 河北省廊坊市固安县*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 crispr 系统 分子 侧向 层析 检测 方法 试纸 | ||
1.一种基于CRISPR系统的分子侧向层析检测方法,包括标记探针的切割、标记物的释放、侧向层析试纸检测过程,其特征在于,所述方法包括:
标记探针的切割:所述标记探针包含相连的核酸探针和标记物,当所述核酸探针接触到被待检测分子激活后的所述Cas蛋白,所述核酸探针被切割;
标记物的释放:所述标记探针固定设置,所述标记物包含有不少于两个抗原决定簇,当所述核酸探针被切割,所述标记物从固定处释放;
标记物的检测:所述侧向层析试纸采用夹心法或捕获法检测被释放的标记物,从而实现待检测分子的检测。
2.根据权利要求1所述的基于CRISPR系统的分子侧向层析检测方法,其特征在于,所述核酸探针可被激活后的Cas蛋白或工程化的微小Cas蛋白切割。
3.根据权利要求1所述的基于CRISPR系统的分子侧向层析检测方法,其特征在于,所述核酸探针为双链DNA序列、单链DNA序列、单链RNA序列和双链RNA序列中的任意一种或多种的组合。
4.根据权利要求1所述的基于CRISPR系统的分子侧向层析检测方法,其特征在于,所述标记探针固定设置于所述侧向层析试纸上。
5.根据权利要求1所述的基于CRISPR系统的分子侧向层析检测方法,其特征在于,所述标记探针固定设置于固相载体上。
6.根据权利要求5所述的基于CRISPR系统的分子侧向层析检测方法,其特征在于,所述标记探针固定设置于磁微粒上。
7.一种基于CRISPR系统的分子侧向层析检测试纸条,包括侧向层析试纸和Cas蛋白,其特征在于,所述试纸条还包括固定的标记探针,所述标记探针包含相连的核酸探针和标记物,所述标记物包含有不少于两个抗原决定簇。
8.根据权利要求7所述的基于CRISPR系统的分子侧向层析检测试纸条,其特征在于,所述标记物由有色或无色微球或胶体金组成,所述微球上包含不少于一个抗原决定簇。
9.根据权利要求8所述的基于CRISPR系统的分子侧向层析检测试纸条,其特征在于,所述微球上包含抗体或抗原,可通过捕获法进行检测。
10.根据权利要求7所述的基于CRISPR系统的分子侧向层析检测试纸条,其特征在于,所述侧向层析试纸设置有背板、样品垫、结合垫、NC膜和吸水垫;
所述Cas蛋白设置于所述样品垫上;
所述标记探针固定设置于所述样品垫上;
所述结合垫上设置有第一抗标记物抗体-标记载体复合物;
所述NC膜上设置有检测线,所述检测线包被有第二抗标记物抗体。
11.根据权利要求10所述的基于CRISPR系统的分子侧向层析检测试纸条,其特征在于,所述NC膜上设置有检测线,所述检测线包被有标记物捕获物。
12.根据权利要求10所述的基于CRISPR系统的分子侧向层析检测试纸条,其特征在于,所述样品垫、结合垫、NC膜和吸水垫依次粘贴于所述背板上。
13.根据权利要求10所述的基于CRISPR系统的分子侧向层析检测试纸条,其特征在于,所述结合垫、NC膜和吸水垫依次粘贴于所述背板上,所述样品垫单独设置。
14.根据权利要求10所述的基于CRISPR系统的分子侧向层析检测试纸条,其特征在于,所述核酸探针的一端与所述样品垫固定结合,所述核酸探针的另一端偶联所述标记物。
15.根据权利要求10所述的基于CRISPR系统的分子侧向层析检测试纸条,其特征在于,所述核酸探针设置有亲和素标记,所述样品垫化学偶联有链霉亲和素,所述标记探针通过生物素-亲和素系统固定于所述样品垫上。
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