[发明专利]一种IL-1信号通路响应元件及其应用在审
| 申请号： | 202111088353.8 | 申请日： | 2021-09-16 |
| 公开（公告）号： | CN114480406A | 公开（公告）日： | 2022-05-13 |
| 发明（设计）人： | 周亚凤;申兆兴;黎勇 | 申请（专利权）人： | 广东翠点生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/12 | 分类号： | C12N15/12;C12N15/85;C12N5/10;C12Q1/6897;C12Q1/66;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 段卉 |
| 地址： | 529157 广东省江门市*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 il 信号 通路 响应 元件 及其 应用 | ||
1.一种IL-1信号通路响应元件，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。
2.一种重组载体，其特征在于，为含有权利要求1所述的IL-1信号通路响应元件的质粒。
3.根据权利要求2所述的重组载体，其特征在于，所述质粒上还含有报告基因。
4.一种重组细胞，其特征在于，为含有权利要求2所述重组载体的细胞。
5.根据权利要求4所述的重组细胞，其特征在于，所述细胞为CHO细胞、293细胞、Hela细胞、HepG2细胞、A549细胞和人肝癌细胞中的任一种。
6.一种检测IL-1α或IL-1β的生物学活性的方法，其特征在于，含有将权利要求3所重组载体的细胞分别与梯度浓度的IL-1α或IL-1β混合，培养，去细胞上清液，洗涤细胞，裂解细胞，充分反应，固液分离，取上清液，与荧光素酶底物混合，充分反应，检测化学发光值，其中所述重组载体上含有荧光素酶报告基因。
7.一种白细胞介素-1受体拮抗剂结合IL-1α或IL-1β的生物学活性的方法，其特征在于，含有将权利要求3所重组载体的细胞、已知生物学活性的IL-1α或IL-1β，分别与梯度浓度的IL-1Ra或梯度浓度待测白细胞介素-1受体拮抗剂混合，培养，去细胞上清液，洗涤细胞，裂解细胞，固液分离，取上清液，与荧光素酶底物混合，充分反应，检测化学发光值，其中所述重组载体上含有荧光素酶报告基因。
8.根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于，培养时间为4～22h。
9.根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于，所述含有权利要求3所述重组载体的细胞的浓度为1×104～8×105个/孔。
10.权利要求1所述的IL-1信号通路响应元件、权利要求2所述的重组载体，和/或权利要求4所述的重组细胞在检测具有白细胞介素-1受体拮抗剂、IL-1α或IL-1β的生物活性的应用。
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