[发明专利]使用实时搜索结果动态排除可能存在于主扫描中的产物离子

说明书

一种方法包括：获得第一质谱；选择所述第一质谱的第一峰；碎裂并分析所述第一峰的离子以获得第二质谱；对所述第二质谱中对应于峰的化合物执行实时谱搜索；识别基于所述实时谱搜索识别的所述化合物的碎片；将所述碎片的质荷比添加到排除列表中；选择存在于所述第一质谱中且不在所述排除列表上的第二峰；以及碎裂和分析所述第二峰的离子以获得第三质谱。

技术领域

本公开大体上涉及离子色谱领域，其包括使用实时搜索结果来动态地排除可能存在于主扫描中的产物离子。

背景技术

质谱仪通常与色谱系统耦合以便识别和表征来自测试样品的洗脱物质。在这种耦合系统中，洗脱液被电离，并且获得一系列质谱扫描用于随后的数据分析。由于测试样品可能包含许多物质或化合物，因此通常希望能够在感兴趣的物质或化合物洗脱时自动确定或识别它们，并使用这些识别来通知随后的串联质谱收集。

串联质谱法，称为MSn，是一种流行且广泛使用的分析技术，其中使衍生自样品的前体离子在受控条件下经受碎裂以产生产物离子。串联质谱法是利用多级质量分析的操作模式，其中在每一级质量分析之间具有碰撞或反应过程。通常，该碰撞或反应过程之前是离子选择步骤，其中将一种或多种离子与母体离子生成的其它前体离子分离。多级质量分析的结合提供了通过提供关于化合物的碎裂或反应特性的附加信息来确定或识别感兴趣的物质或化合物的能力。产物离子谱含有可用于结构测定并且用于识别具有高特异性的样品组分的信息。具有两级质量分析的串联质谱通常称为MS/MS或MS2。

在数据相关模式中，洗脱样品由质谱仪自动分析。首先收集母体扫描。该母体扫描通常简单地为存在于已电离洗脱液中的所有物质的MS1扫描。使用各种算法和标准，质谱仪识别母体扫描中的离子用于随后的MS2分析。在一些数据相关的质谱仪方法中，仪器然后可以识别MS2扫描中的产物离子，用于通过更高阶的MSn扫描进一步分析。用于前体离子识别的标准可以简单到强度阈值或电荷状态要求。或者它可以涉及更复杂的过滤，例如动态排除列表，其中先前选择用于MSn分析的离子在用户定义的时间段内从附加MSn分析中排除。

在典型的MS2实验中，可被分析的前体的数目受到色谱峰宽度和质谱仪收集MS2扫描所花费的时间的限制。从上述内容可以理解，需要最小化在数据相关MS2分析期间收集的数据中的冗余。

发明内容

在第一方面，一种方法可以包括获得第一质谱；选择第一质谱的第一峰；碎裂并分析第一峰的离子以获得第二质谱；对第二质谱中对应于峰的化合物进行实时谱搜索；识别基于实时谱搜索识别的化合物的碎片；将碎片的质荷比添加到排除列表中；选择存在于第一质谱中且不在排除列表上的第二峰；以及碎裂和分析第二峰的离子以获得第三质谱。

在第一方面的各种实施例中，添加到排除列表中的质荷比可以基于所识别的化合物的碎片的理论质荷比。

在第一方面的各种实施例中，添加到排除列表的质荷比可基于所识别的化合物的碎片的理论质荷比和用于收集第一质谱的质量分析器的质量准确度或分辨率。在特定实施例中，第一质谱可以具有与第二质谱不同的质量准确度或分辨率。在进一步的实施例中，第一质谱可以比第二质谱具有更高的质量准确度或分辨率。在其它实施例中，执行实时谱搜索可基于第二质谱的质量准确度或分辨率，且将碎片的质荷比添加到排除列表可基于第一质谱的质量准确度或分辨率。

在第一方面的各种实施例中，将碎片的质荷比添加到排除列表中可包括在第二质谱中发现的峰。

在第一方面的各种实施例中，将碎片的质荷比添加到排除列表中可包括通过实时谱搜索识别的理论碎片。在特定实施例中，将碎片的质荷比添加到排除列表中可包括通过实时谱搜索识别且不存在于第二质谱中的理论碎片。

在特定实施例中，其中执行实时谱搜索可基于第二质谱的高碎裂能量，且添加到排除列表的碎片可基于第二质谱中所识别的化合物的低碎裂能量。