[发明专利]金刚烷胺半抗原、金刚烷胺抗原、制备方法以及金刚烷胺单克隆抗体及金刚烷胺检测试剂盒

权利要求书

1.金刚烷胺半抗原A或B，其分别具有如结构式(Ⅴ)或结构(Ⅶ)所示的化学结构：

2.一种制备权利要求1所述的金刚烷胺半抗原A的方法，其中，所述方法包括：

步骤(1)称取2g-10g 3-氨基金刚烷-1-甲酸和1.92-9.6g Boc酸酐加入单口瓶中，加入0.05-0.26g 4-二甲氨基吡啶，用30mL叔丁醇溶解，在70～80℃反应5～8小时；

步骤(2)将反应后液体减压旋蒸，除去溶剂叔丁醇，得到大量淡黄色的油状物，即为粗品化合物2；

步骤(3)将所述粗品化合物2溶解在乙酸乙酯中，使用0.1M硫酸溶液和纯水洗涤两遍后，收集有机相，减压旋蒸，得到化合物2；步骤(4)将0.5-2g所述化合物2溶解在10mL 80％的甲醇水溶液中，加入0.3-1.3g EDC(1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐)和0.25-1.0g NHS(N-羟基丁二酰亚胺)，20～25℃反应1小时，得到中间体化合物3的溶液；将0.9-3.6gβ-丙氨酸的50％m/V水溶液缓慢滴加至反应液中，继续在20～25℃反应过夜；

步骤(5)将所述反应后溶液减压旋蒸除去甲醇和水，再重新加入30mL水和30mL乙酸乙酯，搅拌30分钟后分层，收集有机相，旋蒸后得到粗品化合物4，并将所述粗品化合物4过柱纯化，得到其纯品0.5g；

步骤(6)将0.2-1.0g所述纯化的化合物4溶解在1mL甲醇中，加入0.5mL浓盐酸，在20～25℃搅拌3～5小时，用0.5M氢氧化钠溶液调节pH至6，然后减压旋蒸除去溶剂甲醇和水后，得到0.1-0.6g粗品化合物5；以及

步骤(7)将所述粗品化合物5重新用甲醇溶解后，过滤除去无机盐，滤液减压旋蒸后得到较为纯净的化合物5，使用柱硅胶继续分离纯化，得到所述金刚烷胺半抗原A；

优选地，所述步骤(1)称取5g 3-氨基金刚烷-1-甲酸和4.8g Boc酸酐加入单口瓶中，加入0.13g 4-二甲氨基吡啶，用30mL叔丁醇溶解，在70～80℃反应5～8小时；

所述步骤(2)将反应后液体减压旋蒸，除去溶剂叔丁醇，得到大量淡黄色的油状物，即为粗品化合物2；

所述步骤(3)将所述粗品化合物2溶解在乙酸乙酯中，使用0.1M硫酸溶液和纯水洗涤两遍后，收集有机相，减压旋蒸，得到化合物2；

所述步骤(4)将1g所述化合物2溶解在10mL 80％的甲醇水溶液中，加入0.65g EDC(1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐)和0.5g NHS(N-羟基丁二酰亚胺)，20～25℃反应1小时，得到化合物3的溶液；将1.8gβ-丙氨酸的50％m/V水溶液缓慢滴加至反应液中，继续在20～25℃反应过夜；所述步骤(5)将所述反应后溶液减压旋蒸除去甲醇和水，再重新加入30mL水和30mL乙酸乙酯，搅拌30分钟后分层，收集有机相，旋蒸后得到粗品化合物4，并将所述粗品化合物4过柱纯化，得到其纯品0.5g；

所述步骤(6)将0.5g所述粗品化合物4溶解在1mL甲醇中，加入0.5mL浓盐酸，在20～25℃搅拌3～5小时，用0.5M氢氧化钠溶液调节pH至6，然后减压旋蒸除去溶剂甲醇和水后，得到0.6g粗品化合物5；以及

所述步骤(7)将所述粗品化合物5重新用甲醇溶解后，过滤除去无机盐，滤液减压旋蒸后得到较为纯净的化合物5，使用柱硅胶继续分离纯化，得到所述金刚烷胺半抗原A。

3.一种制备权利要求1所述的金刚烷胺半抗原B的方法，其中，所述方法包括：

步骤(1)将1-5g金刚烷胺与0.98-2.94g乙醛酸溶解在20mL二氯甲烷中，在室温搅拌反应24小时；以及

步骤(2)将所述反应后液体减压旋蒸，除去二氯甲烷后，得到大量白色固体化合物，加入20mL 2M盐酸溶解后，在100℃回流5～8小时后，减压旋蒸除去水，得到0.5-3.2g所述半抗原B；

优选地，所述步骤(1)将2g金刚烷胺与1.96g乙醛酸溶解在20mL二氯甲烷中，在室温搅拌反应24小时；以及

所述步骤(2)将所述反应后液体减压旋蒸，除去二氯甲烷后，得到大量白色固体化合物，加入20mL 2M盐酸溶解后，在100℃回流5～8小时后，减压旋蒸除去水，即得到1.6g所述半抗原B。