[发明专利]一种半红树植物黄槿的组织培养方法

说明书

本发明公开了一种半红树植物黄槿的组织培养方法，属于植物组织培养领域。该方法包括：(1)外植体选择与消毒：以幼嫩的黄槿茎尖作为外植体，消毒处理；(2)愈伤组织形成：将消毒后的黄槿茎尖接入诱导培养基，诱导生成愈伤组织；(3)丛生芽诱导形成：将愈伤组织转接到分化培养基中，诱导形成丛生芽；(4)丛生芽继代培养：丛生芽诱导至平均高度达到1‑2cm时，将单个丛生芽转至继代培养基中，培养至平均高度为3‑4cm；(5)根诱导形成：将继代培养后成熟的芽转接到生根培养基中，诱导根分化成组培苗；(6)幼苗植株形成。本发明通过组织培养能快速得到大量的黄槿组培苗，成活率高于98.5％，能够满足滨海地区防护林造林的需求。

技术领域

本发明涉及植物组织培养技术领域，尤其涉及一种半红树植物黄槿的组织培养方法。

背景技术

黄槿(学名：Hibiscus tiliaceus Linn.)是锦葵科、木槿属常绿灌木或乔木，分布于中国、越南、柬埔寨、老挝、缅甸、印度、印度尼西亚、马来西亚及菲律宾等热带国家；在中国分布于台湾、广东和福建等省。它以观叶、观花为主。黄槿的花期全年，以夏季最盛。可为行道树及海岸绿美化植栽。多生于滨海地区，为海岸防沙、防潮、防风之优良半红树植物树种。

目前，黄槿主要采用播种、扦插方式进行栽培，播种需要采种、晾种以及筛选优良种子等，步骤繁琐且种子萌发率极低；而扦插相对于播种不需要收获种子和筛选良种等过程，但扦插通常采用半木质化的枝条，嫩枝往往被丢弃，对环境不友好；此外，扦插一般在3－6月进行，易受季节影响。黄槿作为防护植物使用，需求量大并且对于成活率要求也比较高，但是迄今为止，相关黄槿组织培养技术的报道极少。

发明内容

本发明的目的是提供一种半红树植物黄槿的组织培养方法，以解决上述现有技术存在的问题，通过组织培养能快速得到大量的黄槿组培苗，成活率高，能够满足滨海地区防护林种植的需求。

为实现上述目的，本发明提供了如下方案：

本发明提供一种半红树植物黄槿的组织培养方法，包括以下步骤：

(1)外植体选择与消毒：以幼嫩的黄槿茎尖作为外植体，并用自来水水洗干净后进行消毒处理；

(2)愈伤组织形成：将消毒后的黄槿茎尖接入诱导培养基，诱导生成愈伤组织；所述诱导培养基为2/3MS培养基+1.5-3.0mg/L 6-BA+0.15-0.30mg/L NAA+25-32g/L蔗糖+4.5-8.5g/L琼脂，pH6.0；

(3)丛生芽诱导形成：将所得愈伤组织转接到分化培养基中，诱导丛生芽分化；所述分化培养基为2/3MS培养基+1.5-3.5mg/L 6-BA+0.05-0.15mg/L NAA+25-32g/L蔗糖+4.5-8.5g/L琼脂，pH6.0；

(4)丛生芽继代培养：将单个丛生芽转接到继代培养基中，增殖培养；所述继代培养基为1/2MS培养基+1.0-3.0mg/L 6-BA+0.05-0.15mg/L NAA+25-32g/L蔗糖+4.5-8.5g/L琼脂，pH6.0；

(5)根诱导形成：将继代培养成熟的芽转接到生根培养基中诱导根的分化；所述生根培养基为1/2MS培养基+0.1-0.5mg/L IBA+0.1-0.5mg/L NAA+10-30g/L蔗糖+4.5-8.5g/L琼脂，pH6.0；

(6)幼苗植株驯化：待组培苗长出7-8片叶片，株高为5-6cm时，放置在散射光下炼苗1-2天，移栽到黄心土和泥炭土混合基质中驯化。

优选的是，步骤(1)中，用自来水把外植体冲洗干净后，放入75％酒精中3-12s，无菌水冲洗3-5次，再用0.1％HgCl₂浸泡灭菌3-5min，再次用无菌水冲洗5-7次。