[发明专利]一种米酵菌酸复合抗原、米酵菌酸抗体及其制备方法和酶联免疫试剂盒有效
申请号: | 202111097785.5 | 申请日: | 2021-09-18 |
公开(公告)号: | CN113801220B | 公开(公告)日: | 2023-07-07 |
发明(设计)人: | 吕晓静;方淑兵;王欢;于秋香;刘红兵 | 申请(专利权)人: | 青岛普瑞邦生物工程有限公司 |
主分类号: | C07K14/795 | 分类号: | C07K14/795;C07K14/765;C07K16/44;G01N33/577;G01N33/58;G01N33/543;G01N33/53 |
代理公司: | 青岛鼎丞智佳知识产权代理事务所(普通合伙) 37277 | 代理人: | 吴春艳 |
地址: | 266000 山东省青岛市高新*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 米酵菌酸 复合 抗原 抗体 及其 制备 方法 免疫 试剂盒 | ||
1.一种米酵菌酸复合抗原,其特征在于,其连接方式如下:载体蛋白-NH-COO-PEG6-NH-COO-BA,载体蛋白与氨基-六聚乙二醇-羧酸上的羧基偶联,然后氨基-六聚乙二醇-羧酸上的氨基与米酵菌酸上的羧基偶联。
2.一种如权利要求1所述的米酵菌酸复合抗原的制备方法,其特征在于,所述制备方法为:采用氨基-六聚乙二醇-羧酸作为连接臂,将该连接臂、米酵菌酸与载体蛋白进行偶联,得到米酵菌酸复合抗原。
3.根据权利要求2所述的米酵菌酸复合抗原的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
连接臂的活化:取EDC、NHS和氨基-PEG6-羧酸混合,室温孵育,得到混合物;
连接臂与载体蛋白的连接:将上述混合物缓慢加入到载体蛋白溶液中,室温孵育;通过超滤除去未结合的载体蛋白以及氨基-PEG6-羧酸,形成氨基-PEG6-载体蛋白复合物;
米酵菌酸的活化:将EDC、NHS和米酵菌酸混合,室温孵育1h,得到活化的米酵菌酸;
米酵菌酸与载体蛋白的连接:将活化的米酵菌酸加入到前述制备得到的氨基-PEG6-载体蛋白复合物中,室温孵育;超滤除去未结合的米酵菌酸后,最终得到米酵菌酸复合抗原。
4.根据权利要求3所述的米酵菌酸复合抗原的制备方法,其特征在于,所述超滤过程中采用分子量为3~10KD的超滤管。
5.根据权利要求3所述的米酵菌酸复合抗原的制备方法,其特征在于,所述载体蛋白为血蓝蛋白、牛血清白蛋白或人血清白蛋白。
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