[发明专利]一种检测黄原胶的双抗体夹心ELISA方法有效
| 申请号： | 202111098119.3 | 申请日： | 2021-09-18 |
| 公开（公告）号： | CN113933498B | 公开（公告）日： | 2023-02-28 |
| 发明（设计）人： | 凌沛学;尹梦月;刘飞;张小刚;张秀华 | 申请（专利权）人： | 山东大学;山东省药学科学院 |
| 主分类号： | G01N33/535 | 分类号： | G01N33/535;G01N33/543;G01N33/58 |
| 代理公司： | 北京秉文同创知识产权代理事务所(普通合伙) 11859 | 代理人： | 陈少丽;张文武 |
| 地址： | 250012 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 黄原胶 抗体 夹心 elisa 方法 | ||
1.一种检测样品中黄原胶的双抗体夹心ELISA方法，所述方法包括如下步骤：
(1)利用抗黄原胶的3A7单克隆抗体作为包被抗体对酶标板进行包被；
(2)对酶标板进行封闭，之后，添加待测样品并孵育一段时间；
(3)添加酶标记的3A7单克隆抗体进行反应；
(4)显色后对酶标板进行检测；
所述3A7单克隆抗体具有轻链可变区和重链可变区，所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述样品选自食品、药物或生物样品。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述3A7单克隆抗体包被浓度为1μg/mL-100μg/mL，所述包被抗体的温度为4℃-16℃。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，采用脱脂奶粉进行封闭；所述封闭的温度为20℃-28℃。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，样品孵育的时间为0.5h-2h。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中，采用辣根过氧化物酶(HRP)标记3A7单克隆抗体。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(4)中，加入显色液进行显色，显色作用时间为10min-45min。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(4)中，对酶标板进行检测为采用酶标仪测定波长450nm处的OD值。
9.根据权利要求1-8任一所述的方法，其特征在于，所述黄原胶为相对分子质量为10万-1000万的黄原胶。
10.权利要求1-9任一所述的方法在定性检测或定量检测样品中黄原胶中的应用。
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