[发明专利]基于卵泡液蛋白表达作为不明原因复发性流产的预警方法

权利要求书

1.一种基于卵泡液HRG、C4B蛋白表达水平作为不明原因复发性流产的预警方法，所述方法非用于疾病诊断治疗；包括如下步骤：

1)卵泡液的收集、保存

收集到的卵泡液在恒温下进行卵冠丘复合物的拾取后将剩余的卵泡液收集，进行1500rpm离心取上清、分装，冻存于-80℃；

2)C4B、HRG卵泡液蛋白浓度ELISA测定

采用相应蛋白的ELISA检测试剂盒，对卵泡液进行相应蛋白浓度的检测；

3)结果统计及分析

若检测获得的卵泡液蛋白的HRG浓度35.80mg/dl时，患者本次取卵周期能获得活产的概率较低；或/和，若检测获得的卵泡液蛋白的C4B浓度2739.7ng/ml时，患者本次取卵周期能获得活产的概率较低；

或者，用同一患者卵泡液蛋白的HRG浓度及C4 B浓度做logistic回归计算获得的预测概率值作为检验变量，患者本次取卵周期是否获得活产作为状态变量绘制ROC曲线；当患者的预测概率值0.5816时，患者本次取卵周期能获得活产的概率较低。

2.根据权利要求1所述的基于卵泡液HRG、C4B蛋白表达水平作为不明原因复发性流产的预警方法，其特征在于：步骤3)中，卵泡液蛋白的HRG浓度35.80mg/dl，以及卵泡液蛋白的C4B浓度2739.7ng/ml，分别由HRG浓度的ROC曲线的Cut-off值以及C4B浓度的ROC曲线的Cut-off值导出；

而HRG浓度的ROC曲线以及C4B浓度的ROC曲线，则分别由多个正常对照及URSA患者的卵泡液蛋白HRG浓度以及卵泡液蛋白C4B浓度作为检验变量，对应患者本次取卵周期是否获得活产作为状态变量绘制而成。

3.根据权利要求1所述的基于卵泡液HRG、C4B蛋白表达水平作为不明原因复发性流产的预警方法，其特征在于：步骤3)中，患者的预测概率值0.5816，由预测概率值ROC曲线的Cut-off值导出；而预测概率值ROC曲线，由多个正常对照样本及URSA卵泡液蛋白的HRG浓度及C4 B浓度做logistic回归计算获得的预测概率值作为检验变量，对应患者本次取卵周期是否获得活产作为状态变量绘制而成。

4.根据权利要求1所述的基于卵泡液HRG、C4B蛋白表达水平作为不明原因复发性流产的预警方法，其特征在于：步骤3)中，所述患者的预测概率值0.5816，对应的蛋白浓度为HRG39.84mg/dl,C4B2374.47ng/ml。

5.根据权利要求2或3或4所述的基于卵泡液HRG、C4B蛋白表达水平作为不明原因复发性流产的预警方法，其特征在于：所述分析比对利用GraphPad Prism 7软件进行作图及统计分析，并且利用MedCalc软件进行ROC曲线的绘制及统计分析。

6.根据权利要求5所述的基于卵泡液HRG、C4B蛋白表达水平作为不明原因复发性流产的预警方法，其特征在于：所述步骤1)卵泡液的收集，取样时间统一为HCG扳机，即LH高峰后36小时，再经阴道取卵术中获得。