[发明专利]桦褐孔菌总三萜的高效提取方法及其精粉的制备方法

说明书

本发明涉及的是桦褐孔菌总三萜的高效提取方法及其精粉的制备方法，它包括：将桦褐孔菌原料粉碎得到桦褐孔菌粗粉；桦褐孔菌粗粉在液氮低温环境下利用球磨机进行研磨处理，得到桦褐孔菌微粉；桦褐孔菌微粉配置成桦褐孔菌悬浊液；桦褐孔菌悬浊液采用剪切超细粉碎处理，得到桦褐孔菌超微粉悬浊液；桦褐孔菌超微粉悬浊液离心得到沉淀，将沉淀烘干得到桦褐孔菌超微粉；桦褐孔菌超微粉置于汽爆试验装置中，得到超微破壁粉；超微破壁粉中添加乙醇，真空结合超声微波辅助浸提，得到桦褐孔菌总三萜粗提液；真空浓缩，得到桦褐孔菌总三萜浓缩浸提液。本发明在相同提取率下降低乙醇用量和提取时间，得到的三萜的纯度高，桦褐孔菌总三萜的生物活性高。

一、 技术领域：

本发明涉及桦褐孔菌功能性成分提取技术领域，具体涉及的是桦褐孔菌总三萜的高效提取方法及其精粉的制备方法。

二、背景技术：

桦褐孔菌（Inonotus obliquus(Fr.)Pilat）又被称为白桦茸、斜管纤孔菌等，主要分布在北半球北纬40～50°的地区，如俄罗斯、日本、芬兰，在我国主要分布在吉林省长白山地区、黑龙江大小兴安岭等地区，极具地域特色。目前，美国、日本、韩国等研究人员对桦褐孔菌正加大研究力度，尤其是俄罗斯，民间利用野生桦褐孔菌子实体治疗多种疾病。桦褐孔菌在世界各地已引起广泛重视和关注。桦褐孔菌的重要的活性成分有多糖、桦褐孔菌素、桦褐孔菌醇、多种氧化三萜类化合物、多种羊毛甾醇型三萜类化合物、叶酸衍生物、芳香族的香草酸、丁香酸及γ羟基苯甲酸，还有报道称已分离出单宁化合物、类固醇、生物碱类化合物、黑色素类、低分子多酚类及木质素类化合物。研究表明，桦褐孔菌具有抗肿瘤、提高免疫力、降血糖、降血压、降血脂、抗菌功效。在俄罗斯民间，桦褐孔菌被视为治疗肿瘤的神药，药用价值很高。随着人类对菌类药物的重新认识，桦褐孔菌在全球范围内将会有广阔的开发前景。

三萜类物质是其中含量较高的生物活性成分，具有抗肿瘤、抗氧化、抗炎，降糖等作用，具有广阔的应用前景。三萜类物质虽具有良好的功能特性，但因其主要溶解在乙醇等有机溶剂中且具有热敏性，使其应用受到限制。主要体现在：一是人们食用桦褐孔菌主要采用热水浸泡的方式，三萜类物质无法在水溶液中溶出，随残渣丢弃；二是三萜是一种热敏性成分，在提取过程中提取温度普遍在70℃以上，会导致三萜受高温的影响而被氧气氧化；三是桦褐孔菌中三萜含量较低，含量为20～60mg/g，导致人体的摄入量不足。

目前，三萜类物质的提取方法较多，工艺各不相同。中国发明专利申请CN101849973A公开了一种超声辅助三萜提取物的制备方法。该方法将桦褐孔菌粉碎、过筛、超声乙醇浸提、浓缩干燥、萃取纯化，最终得到三萜类物质。其以原料和乙醇的比例为1g:8-12mL的比例加入70%-95%的乙醇，100-150W的超声功率，提取次数2-4次，每次2-4h，在纯化时采用乙醇浸膏与水用量为1g:20-50mL，石油醚重量为乙醇浸膏为10-30倍，正丁醇重量为乙醇浸膏的10-30倍，最高三萜得率为6.3%，纯度为11.57%。该方法在加工过程中有机溶剂用量过大，提取纯度低，并且在提取过程中长时间高温并且与空气接触，会对三萜活性造成一定影响。

中国发明专利申请CN107841523A公布了一种群体感应分子诱导从桦褐孔菌中提取三萜类物质方法。该方法将桦褐孔菌菌种活化、制备培养基、接种、发酵、加入分子诱导剂、菌体发酵液的分离和提取、纯化获得桦褐孔菌三萜类物质，该方法最高提取率为11.473mg/100mL。该方法可以工业化连续生产，但是由于发酵方法操作复杂，不可控因素较多，提取效率波动较大，成本较高。

中国发明专利申请CN112790382A公布了一种采用动态高压微射流的方法提取桦褐孔菌三萜类物质。该方法将桦褐孔菌干燥粉碎、添加提取剂后均质、动态高压微射流处理、离心、浓缩、冷冻干燥得到桦褐孔菌总三萜，该方法三萜提取率能达到25mg/g以上。该方法具有降低物料粒度和增加溶剂的穿透力等优点。但是该方法生产成本高，处理量小等问题。