[发明专利]一种苦杏仁的UPLC-Q-TOF-MS指纹图谱检测方法在审
申请号: | 202111102770.3 | 申请日: | 2021-09-14 |
公开(公告)号: | CN113791155A | 公开(公告)日: | 2021-12-14 |
发明(设计)人: | 张雅莉;韩建勋;付萌;杨扬;刘浩;李捷 | 申请(专利权)人: | 谱尼测试集团北京检验认证科学研究院有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/72;G01N30/86 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 苦杏仁 uplc tof ms 指纹 图谱 检测 方法 | ||
1.一种苦杏仁的UPLC-Q-TOF-MS指纹图谱检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
a)制备供试品溶液
称取适量粉碎样品,甲醇溶液溶解,超声提取,取上清液经微孔滤膜过滤,制得供试品溶液;
b)采集供试品溶液的UPLC-Q-TOF-MS基峰离子流谱图
样品溶液经超高效液相色谱分离和高分辨质谱检测,采集基峰离子流谱图;
c)将b)中谱图导入到中药色谱指纹图谱相似度评价系统并确定共有峰
将不同产地17批次苦杏仁谱图以cdf格式导入“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)”进行分析,设定时间窗宽度为0.2min,对17批次苦杏仁谱图进行多点校正后自动峰匹配,共确定25个共有峰;
d)以中位数法生成对照指纹图谱;
e)计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积,并进行相似度评价。
2.根据权利要求1所述的一种苦杏仁的UPLC-Q-TOF-MS指纹图谱检测方法,其特征在于,所述的制备供试品溶液方法为:取苦杏仁样品,粉碎后过二号筛,取适量粉末于50mL具塞离心管中,加入适量80%甲醇,涡旋混匀,超声30min,取上清液过0.22μm滤膜即得供试品溶液。
3.根据权利要求1所述的一种苦杏仁的UPLC-Q-TOF-MS指纹图谱检测方法,其特征在于,所述的超高效液相色谱分离条件为:色谱柱选用规格为100mm×2.1mm,1.8μm的AcquityHSS T3色谱柱;柱温为45℃;流动相A为0.1%甲酸水溶液,流动相B为乙腈,梯度洗脱;梯度洗脱的条件为0~5.0min,流动相A为90%→85%;5.0~10.0min,流动相A为85%→80%;10.0~12.0min,流动相A为80%→50%;12.0~22.0min,流动相A为50%→10%;22.0~35.0min,流动相A为10%;35.0~35.1min,流动相A为10%→90%;35.1~37.0min,流动相A为90%;流速为0.5mL/min;进样量为5μL。
4.根据权利要求1所述的一种苦杏仁的UPLC-Q-TOF-MS指纹图谱检测方法,其特征在于,所述的高分辨质谱检测条件为:离子源为ESI-;离子源温度为110℃;脱溶剂气温度为550℃;脱溶剂气流速为600L/h;锥孔气流速为50L/h;毛细管电压为2.0kV;锥孔电压为40V;工作模式:MSE模式;扫描模式:灵敏度模式;扫描范围:m/z 50~1000;低碰撞能量为off,高碰撞能量为20~40eV;扫描时间为1.0s。
5.根据权利要求1所述的一种苦杏仁的UPLC-Q-TOF-MS指纹图谱检测方法,其特征在于,所述的共有峰部分鉴定结果为:1号峰为蔗糖,保留时间为0.52min;2号峰为柠檬酸,保留时间为0.73min;3号峰为6’-O-β-D-葡萄糖基龙胆苦苷,保留时间为1.23min;4号峰为3,4,5-三甲氧基苯基-1-O-[β-D-呋喃芹糖基-(1→6)]-β-D-吡喃葡萄糖苷,保留时间为1.80min;5号峰为苦杏仁苷,保留时间为2.29min;6号峰为野樱苷,保留时间为3.42min;14号峰为甲基灵芝烯酸D,保留时间为17.22min;15号峰为白曼陀罗素H,保留时间为18.23min;19号峰为20(R)-人参皂苷Rh2,保留时间为23.52min;20号峰为大豆脑苷II,保留时间为24.19min。
6.根据权利要求1所述的一种苦杏仁的UPLC-Q-TOF-MS指纹图谱检测方法,其特征在于,所述的相似度可作为苦杏仁质量评价参数,相似度应大于0.90。
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